研究背景:肿瘤是当今危害人类健康的最严重疾病之一,发病率和死亡率逐年增加,侵袭和转移是恶性肿瘤最突出的特征,严重威胁患者的健康。手术切除和化学疗法仍然是治疗的最佳选择,但是,多数恶性肿瘤初次诊断时肿瘤细胞就已转移至重要器官（如肺、肝、脑）,损害患者多系统和器官的生理功能。腺癌是恶性肿瘤的重要亚型,可起源于多种器官,并极易发生转移。其中,肺癌在我国乃至全世界的发病率和死亡率均最高,而肺腺癌又占全部肺癌的50%,发病隐匿,侵袭性强,且呈逐年增加趋势,总体生存率较低。此外,胰腺癌是最致命的恶性肿瘤之一,而临床80%的病例是腺癌,在无症状癌症中居首位。胰腺癌由于缺乏可靠的标志物在早期很难诊断,5年生存率仅在8%左右。因此,阐明腺癌的发生发展机制对有效的防治有重要意义。胰腺星状细胞是胰腺癌上皮间质产生和降解的主要调节细胞,是胰腺癌微环境形成的关键参与者,与胰腺癌存在复杂的交互作用。我们课题组前期研究提示SDF-1/CXCR4参与了胰腺星状细胞与胰腺癌的相互作用的调节。近几年,很多研究发现胞外囊泡（Extracellular vesicles,EVs）在肿瘤与微环境相互作用中起重要的信息传递作用,然而,胰腺星状细胞来源的胞外囊泡（Pancreatic stellate cell-derived,PSCs-EVs）在胰腺癌与其微环境的交互作用中发挥何种作用及其相关分子机制尚不明确。本研究首先利用生物信息学方法筛选影响肿瘤生存和预后的关键基因;然后提取PSCs-EVs,观察PSCs-EVs对胰腺癌细胞的侵袭、转移及分泌功能影响。旨在探究胞外囊泡在腺癌发生发展中的作用。研究目的:第一部分,通过GEO数据库中发现与腺癌（肺腺癌和胰腺癌）生存预后相关的关键蛋白编码基因;第二部分,探究胰腺星状细胞来源的胞外囊泡影响筛选到的关键蛋白编码基因的分子机制。研究方法:第一部分,寻找腺癌共同关键编码蛋白基因,我们通过生物信息学方法,利用GEO数据库分别寻找肺腺癌和胰腺癌中癌组织与正常组织间的差异基因。并对这些差异基因进行KEGG和GO分析研究其主要参与生物学通路以及生物学功能。然后对共同差异基因构建PPI网络寻找关键中枢基因,并对关键基因进行生存分析。最后通过q RT-PCR实验验证关键基因在癌组织和正常组织中的m RNA水平表达差异。第二部分,研究PSCs-EVs对胰腺癌的影响,我们通过划痕和Transwell实验探究胞外囊泡对胰腺癌的迁移和侵袭的影响。q RT-PCR和Western Blot检测胞外囊泡对胰腺癌分泌CXCR4和筛选的关键基因的影响。为了进一步探究筛选的关键基因在胞外囊泡促进胰腺癌过程发挥的作用,在胰腺癌细胞系中敲低筛选的关键基因,通过划痕和Transwell检测其对胰腺癌行为学功能的影响,通过Western Blot检测胞外囊泡是否通过激活PI3K/AKT通路促进筛选的关键基因表达。研究结果:1.在寻找腺癌共同关键编码蛋白基因的部分,我们发现TOP2A在两种侵袭性强的腺癌中均为关键编码基因,ASPM、CCNB2、CDC20、CDC45、MELK、TOP2A和UBE2T是编码肺腺癌的关键基因,而ANLN、CCNB1、CDK1、CEP55、ECT2、NUSAP1、RACGAP1、TOP2A和ZWINT是编码胰腺癌的关键基因。2.在研究PSCs-EVs对胰腺癌的影响部分,我们发现PSCs-EVs可以被胰腺癌细胞PANC-1摄取并促进其迁移,也可促进胰腺癌的侵袭,并上调CXCR4和TOP2A的表达。划痕和Transwell实验表明,胰腺癌细胞系敲低TOP2A可以降低癌细胞的迁移和侵袭能力,并能够削弱胞外囊泡的促癌作用。同时,Western Blot表明,胞外囊泡可以激活PI3K/AKT通路,抑制PI3K/AKT通路的激活可以降低TOP2A表达。研究结论:1.TOP2A是肺腺癌和胰腺癌共同关键编码蛋白基因,且与肺腺癌和胰腺癌的生存相关。2.PSCs-EVs可以通过激活胰腺癌细胞PANC-1的CXCR4/PI3K/AKT通路而促进TOP2A的表达,并增强其迁移和侵袭。