【摘 要】
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目的:进一步探讨左卡尼汀对链脲霉素诱导的大鼠糖尿病肾病的保护作用及其机制。方法:实验SD大鼠随机分为6组:正常对照组、左卡尼汀50mg/kg组(Con+L50)和左卡尼汀200mg/kg组(C
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目的:进一步探讨左卡尼汀对链脲霉素诱导的大鼠糖尿病肾病的保护作用及其机制。方法:实验SD大鼠随机分为6组:正常对照组、左卡尼汀50mg/kg组(Con+L50)和左卡尼汀200mg/kg组(Con+L200),3组均腹腔内注射生理盐水(0.9%NS 1OmL/kg),静脉注射两种剂量的左卡尼汀12周;另分为DN模型组、DN+L50组和DN+L200组,均腹腔注射链脲霉素65mg/Kg诱导糖尿病肾病模型,静脉注射两种不同剂量左卡尼汀1次/day,共12周。实验开始、每四周和实验结束时检测全部的大鼠体重,尾静脉采血和收集尿样本,采用全自动生化分析仪检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)及尿蛋白排泄量(UPE);酶联免疫法测定尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)排泄量。第12周末氯胺酮麻醉处死大鼠后取出肾脏,采用PAS染色方法观察肾脏病理和检测肾小球硬化指数(GSI),免疫组化观察肾组织中ED-1阳性细胞数和WT-1;电镜观察肾小球基底膜及足细胞形态及数量;测定肾组织中 MCP-1、TLR-2、TGF-β1、βig-h3、Bcl-2、Caspase-3、NF-κB、I-κB 和 MnSOD。结果:与正常组相比,DN模型大鼠体重明显减轻(P<0.05),而两组不同剂量左卡尼汀治疗后大鼠体重较DN模型组增加(均P<0.05)与DN模型组比较,两组左卡尼汀组大鼠Scr明显降低及UPE减少(均P<0.05);DN模型组大鼠空腹血糖与左卡尼汀两组间比较均无统计学差异。与正常组相比 DN 组 MCP-1(100.6±2.4%vs 221.4±32.7%)、TLR-2(100.3±2.1%vs 168.4±29.3%)、TGF-β1(100.4 ±5.3%vs 279.2 ± 16.8%)、βig-h3(101.8 ±3.2%vs 230.2 ± 21.5%)、NF-κB(100.0 ± 3.7%vs 247.6 ± 23.3%)及Caspase-3(100.0 ±4.1%vs 169.8 ± 13.3%)表达增多(均p<0.05,p<0.01),而I-κB(100.0 ± 2.8%vs 49.8± 11.0%)和Bcl-2(100.0 ± 2.8%vs 43.6 ± 10.2%,P<0.05)及MnSOD(100.5±2.7%vs 56.4±4.5%)表达降低(均p<0.05orp<0.01)。与正常组相比,DN组尿中8-OHdG排泄量增多(83.8±9.3ng/dayvs165.2±37.2ng/day,P<0.05)。与DN模型组比较,左卡尼汀低剂量组MCP-1(DNvs183.2±17.9%)、TLR-2(DN vs 145.6±13.7%)和TGF-β1(DN vs 225.5 ± 2.6%)、βig-h3(DN vs 201.3 ±6.5%)、NF-κB(DNvs225.1±21.7%)和Caspase-3(DNvs143.7±6.7%)的表达下降,I-κB(DN vs 60.2± 5.9%)、Bcl-2(DN vs 143.7±6.7%)和 MnSOD(DN vs64.7±3.8%)表达增高(均p<0.05),尿8-OHdG排泄量(DNvs228.3±12.9ng/day,P<0.05)减少。而与左卡尼汀低剂量组比较,高剂量组上述指标的改变更明显。与正常对照组相比DN组肾脏病理表现为肾小球硬化,足细胞数量减少及足突融合、基底膜增厚,ED-1阳性细胞数量增多,WT-1表达减少,与DN组比较左卡尼汀两组肾小球硬化程度减轻,足细胞数量增多,足突结构清楚,基底膜变薄,ED-1阳性细胞数减少,WT-1表达增多。结论:左卡尼汀对链脲霉素诱导的大鼠糖尿病肾病具有良好的保护作用,其机制可能与左卡尼汀抑制炎症,抗氧化及抑制凋亡相关。
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