赶黄草的质量评价及抗肝纤维化活性研究

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赶黄草(Penthorum chinense Pursh),学名扯根菜,为虎耳草科扯根菜属植物,是我国该属植物中仅有的一种。作为苗族传统的解酒良药,赶黄草具有清热、解毒、退黄、化湿等功效。野生赶黄草广泛分布于我国与东南亚国家,但是只有我国的可以入药,目前已经被驯化并大规模种植,以四川古蔺生产的为道地药材。以赶黄草单味药材为原料生产的肝苏颗粒已经在临床上证明具有良好的保肝活性,但是其有效活性成分及其药理作用机制目前还不明确。因此本课题从这两方面入手展开实验,以期为赶黄草的进一步深入研究提供基础和研究方向。通过HPLC-QTOF/MS液质联用技术建立赶黄草检测方法并进行方法学验证,在此基础上建立赶黄草乙醇提取物的指纹图谱;通过一级、二级质谱数据,以及检索知网、Sic Finder等数据库对指纹图谱中的色谱峰进行推测指认,得到32种化合物。通过主成分分析和聚类分析,考察了10批次(Y1:四川古蔺赶黄草合作社;Y2:重庆康嘉药业有限公司;Y3:古蔺宏安药业有限公司;Y4:四川双成医药;Y5:谯邑百草;Y6:花初良;Y7:西爵;Y8:百年和膳;Y9:藏曦堂;Y10:四川邓氏中药行)不同厂家生产的赶黄草之间的质量差异。结果表明,除样品Y6(花初良)、Y9(藏曦堂)外,其余8批次样品的质量基本一致,其中以样品Y10(四川邓氏中药行)的综合得分最高。为进一步完善赶黄草质量控制和深度开发奠定基础。通过网络药理学研究筛选赶黄草治疗肝纤维化的主要活性成分,预测其活性成分的作用靶点,建立“药物成分-靶点-疾病”网络,探讨赶黄草治疗肝纤维化的作用机制。通过数据库共检索筛选得到赶黄草中22种化学成分相关靶点189个,肝纤维化疾病相关靶点949个,两者交集靶点82个。通过String数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建蛋白相互作用网络,结果显示SRC、PIK3R1、PIK3CA为三个关键靶点。“药物成分-靶点-疾病”网络的拓扑分析计算结果显示,山奈酚、赶黄草素F、赶黄草酮C可能为潜在活性成分。并通过KEGG通路分析预测赶黄草治疗肝纤维化的可能信号通路。网络药理学的研究结果为后期进一步研究赶黄草中抗纤维化的活性成分及其作用机制提供了研究方向和理论依据。通过CCl4诱导产生急性肝损伤建立大鼠肝损伤模型,考察赶黄草70%乙醇提取物在肝损伤修复过程中对肝纤维化进程的干预和影响。结果表明,赶黄草70%乙醇提取物能过够降低肝损伤大鼠血浆中ALT的活性;Western Blot的结果显示,赶黄草70%乙醇提取物能够明显降低TNF-α和TGF-β在肝脏组织中的表达,说明赶黄草能够干预和影响CCl4诱导产生的急性肝损伤修复过程中的肝纤维化进程,其作用机制可能与抑制炎症反应有关。
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