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恶性肿瘤是严重危害人类健康的一种疾病,放射治疗是治疗肿瘤的重要手段,但因为肿瘤周围存在的重要器官,使放疗剂量受到限制。因此提高放疗敏感性成为提高放疗效果的重要途径。为探讨细胞核PTEN蛋白是否能够提高肿瘤放疗敏感性,为肿瘤的治疗提供新的思路,我们从新鲜胎盘提取RNA,进行RT-PCR,经酶切鉴定和测序证明获得基因序列与Gene Bank完全一致。以PMD-PTEN质粒为模板,利用PCR将核定位信号加入PTEN序列。根据基因工程技术,获得pcDNA3.1-PTEN、pcDNA3.1-N-PTEN质粒;将胶质瘤细胞分为对照组、空质粒组、PTEN组、核PTEN组,Westernblot检测PTEN蛋白、P53蛋白、cyclin D1蛋白、在照射前、照射后48小时蛋白表达的变化;检测PKC、p-PKC在照射前、照射后瞬时、照射后12小时表达水平的变化;γ-H2AX检测DNA双链断裂;流式细胞仪检测细胞周期的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡的变化;MTT检测细胞增殖。PTEN组、核PTEN组PTEN蛋白表达较对照组、空质粒组明显增加;P53蛋白PTEN组、核PTEN组PTEN蛋白表达较对照组、空质粒组明显增加;cyclin D1蛋白PTEN组、核PTEN组PTEN蛋白表达较对照组、空质粒组明显减少;质粒转染24小时后,4.0Gyγ射线照射48小时后,P53蛋白PTEN组、核PTEN组PTEN蛋白表达较对照组、空质粒组明显增加。射线照射后,cyclin D1蛋白PTEN组、核PTEN组蛋白表达较对照组、空质粒组明显减少;但各组均比照射前增加。PKC表达水平稳定不变,而p-PKC则在照射前表达水平低,照射15分钟后迅速增加;照射后8小时对照组、空质粒组回复到正常水平,PTEN组、核PTEN组仍维持在高水平;PTEN组、核PTEN组与对照组、空质粒组比较DNA双链断裂修复延迟;未照射时,PTEN组、核PTEN组较对照组、空质粒组G1周期增多;而照射后PTEN组、核PTEN组较对照组、空质粒组G2/M周期增多,具有明显差异;在照射前、照射后PTEN组、核PTEN组较对照组、空质粒组凋亡增多,具有明显差异;未照射时,PTEN组、核PTEN组较对照组、空质粒组OD值明显减少,照射后1天、2天、3天PTEN组、核PTEN组较对照组、空质粒组OD值明显减少。实验证明,PTEN组、核PTEN组联合γ射线通过阻滞细胞周期,抑制了肿瘤细胞增殖,延迟DNA双链断裂的修复,促进细胞凋亡。PTEN促进肿瘤细胞放射敏感性通过核PTEN途径实现。