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目的： 精神分裂症是一种遗传度为80％的复杂疾病，目前认为精神分裂症的发生是早期神经发育异常的基础上，受多个微效基因调控及环境因素影响。泛素蛋白酶体系统(ubiquitin proteasome system，UPS)是翻译后修饰机制之一，与神经系统的功能联系密切，目前已有研究认为精神分裂症患者脑内存在涉及UPS的蛋白功能或基因表达异常。神经前体细胞表达发育进行性下调基因4(neuralprecursor cell expressed developmentally down-regulated4，NEDD4)是一种泛素连接酶，可调节谷氨酸受体(glutamate receptor1，GluRl)的周转，并参与中枢神经系统的分化过程。近年来，国外已通过动物模型及尸检研究证实NEDD4蛋白参与神经退行性疾病的病理过程，但国内外尚缺乏探讨NEDD4基因与精神分裂症相关性的研究。为此，本研究首先通过病例对照关联研究方法，检测NEDD4基因5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)位点与精神分裂症及其临床症状的相关性，然后通过阳性关联SNPs位点的初步功能研究，以期解释Nedd4蛋白参与精神分裂症发病的可能机制。 方法： 本研究为病例对照研究，利用国际人类基因组单体型图计划中中国汉族人群NEDD4基因的SNPs数据信息与软件选择标签SNPs的方法相结合，选择了位于3'非翻译区(3'untranslated region，3'UTR)或外显子的共5个SNPs位点(rs3088077、rs11550869、rs7162435、rs2303579和rs62043855)。通过Taqman探针法，对464例中国汉族精神分裂症患者及487名正常对照进行5个SNPs位点的等位基因分型，探讨NEDD4基因5个SNPs位点与精神分裂症的相关性。另外，使用自制的一般资料调查表收集一般人口学资料，以阳性与阴性症状量表(Positive and Negative Syndrome Scale，PANSS)评估患者精神病性症状的特点及严重程度，探索NEDD4基因多态性与精神分裂症临床症状的相关性。最后，根据其在基因上位置的不同，分别利用不同的分子生物学技术初步探讨阳性关联SNPs位点碱基变异对NEDD4基因功能的影响。对于3'UTR的SNPs位点，利用双荧光素酶报告基因系统，构建NEDD4基因3'UTR的野生型，利用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction，PCR)介导的定点突变对野生型3'UTR点突变，构造突变型重组质粒，将野生型及突变型质粒分别转染HEK293细胞后检测荧光素酶报告基因的活性，通过比较荧光素酶活性的差异检测SNPs点突变对基因表达的影响;对于位于外显子的SNPs位点，分别构建NEDD4基因编码序列的野生型与突变型重组质粒，利用免疫印迹及免疫沉淀的方法检测NEDD4蛋白对底物蛋白GluR1的泛素化水平。 结果： 1、病例组及对照组在rs3088077(等位基因:x2=18.024，P＜0.001，基因型:x2=16.634，P＜0.001)、rs7162435（等位基因:x2=6.771，P=0.009，基因型:x2=7.352，P=0.025）及rs2303579(等位基因:x2=11.253，P=0.001，基因型:x2=12.248，P=0.002)3个SNPs位点的等位基因频率及基因型频率分布的差异均有统计学意义;rs11550869（等位基因:x2=0.684，P=0.408，基因型:x2=0.636，P=0.728）、rs62043855（等位基因:x2=1.090，P=0.296，基因型:x2=1.156，P=0.561）2个SNPs位点的等位基因频率及基因型频率分布的差异均不具有统计学意义; 2、NEDD4基因rs7162435的TT基因型在PANSS量表中的兴奋敌对因子得分(14.53±3.925)明显升高，与其他两种基因型的得分均值相比差异有统计学意义（F=3.551，P=0.029）;多元回归模型的结果显示，rs7162435多态性参与兴奋敌对因子得分的多元回归方程，决定系数R2显示rs7162435、起病形式及年龄可以解释兴奋敌对得分的3.5％; 3、NEDD4基因全长的野生型3'UTR成功构建入荧光素酶报告载体PGLO中，成功构建rs3088077、rs7162435单个点突变及两个位点双突变的突变型重组质粒;与空载体组相比，不论野生型还是突变型，NEDD4基因全长的3'UTR均能够下调荧光素酶活性（P均＜0.001）;但荧光素酶表达并未因rs3088077及rs7162435碱基的突变而存在差异; 4、NEDD4基因的编码序列成功构建入真核细胞表达载体pcDNA3.1，在野生型的基础上成功点突变rs2303579;突变型组与野生型相比，NEDD4蛋白对底物蛋白GluR1泛素化水平的差异不具有统计学意义（P=0.476）。 结论： 1、NEDD4基因的SNPs位点rs3088077、rs7162435及rs2303579与精神分裂症的发生可能存在相关性，rs7162435的TT基因型可增加精神分裂症患者兴奋敌对的风险;NEDD4基因可能是参与精神分裂症发病机制中的一个微效基因，且该基因上的SNPs位点rs3088077、rs7162435及rs2303579可能具有遗传标记功能; 2、NEDD4基因的全长3'UTR能够显著下调荧光素酶基因的表达活性，但重组质粒中rs3088077及rs7162435碱基的突变对荧光素酶活性影响不明显，rs2303579的突变体NEDD4蛋白对GluR1的泛素化水平与野生型NEDD4蛋白的作用一致，以上3个多态性位点对NEDD4基因功能的影响均需进一步深入研究; 3、泛素蛋白酶体系统、谷氨酸系统及神经发育三大系统紧密联系、相互作用，可能共同参与到精神分裂的发病机制中。