螺旋藻多糖提取纯化方法研究

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螺旋藻作为一种被广泛使用的营养食品逐渐被人们所熟知。现阶段对螺旋藻的研究主要集中在其含有的各种活性物质上,螺旋藻中的螺旋藻多糖这种活性物质作为一种纯天然物质已经被证实具有免疫调节、抗肿瘤、抗辐射、抗病毒、抗氧化、抗衰老和降血糖等作用。但是由于对螺旋藻多糖的提取和纯化工艺还不能达到规模化生产使其无法被更加广泛的使用。本论文对螺旋藻多糖的提取的常规热水方法的进行了优化,并探索了螺旋藻多糖提取的一种新方法,对改进螺旋藻多糖的纯化方法进行了研究。结果如下:在螺旋藻多糖的提取方法上,本文首先使用常规热水提取法提取螺旋藻多糖,在提取过程中进行了关于,提取时间、固液比、温度和提取次数单因素实验确定了工艺条件为提取6h,固液比1:9,提取温度80℃,提取次数2次。探索了超声提取和冷碱液提取相结合提取螺旋藻多糖的方法。采用超声时间、提取时间、溶液的pH值和提取时的固液比四个因素的三个水平进行正交实验确定较佳提取条件,温度为常温,超声时间1h,提取时间2h,溶液的pH值为9,固液比1:9。并对比了两种提取方法的提取率,发现新方法的提取率较传统方法提高了5%左右。本研究主要进行提取和纯化过程中多糖得率和蛋白质的除去率比较,选择了硫酸蒽酮法进行实验各阶段总糖含量的测定,使用Folin-酚法测定蛋白质含量。并根据胰蛋白酶的最佳酶解条件对其进行了在四组pH值为8的缓冲溶液中蛋白酶活力的测定,确定了酶解反应时间。在螺旋藻多糖的纯化阶段,没有使用凝胶层析和高效液相色谱。而是采取了一种更为简便并且易于工业化生产的方法。本文分为主纯化,第一辅助纯化和第二辅助纯化三个阶段,分别为使用胰蛋白酶酶解,高岭土和活性炭进行过滤以及透析过程。结果证明各纯化阶段均达到了预期的实验结果。进行测定后发现最后的产品中不含有核酸,多糖含量在98%以上,蛋白质含量仅为1%左右。
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