氟尼辛属于非甾体类抗炎药(NSAIDs),兽医临床常用葡甲胺作为增溶剂制成氟尼辛的葡甲胺盐(Flunixin-meglumine, FM),主要通过抑制环氧化酶、减少前列腺素等炎性介质的生成而发挥解热、镇痛和抗炎作用。含氟尼辛的相关制剂在国内兽医临床已批准使用,但针对动物源性食品中氟尼辛残留量的检测方法还未见报道。因此建立猪组织中氟尼辛残留量的检测方法不仅有助于对动物性食品中应用此类药物进行监控,而且通过对有关氟尼辛注射剂在猪体内消除规律的研究,不仅能进一步确证残留检测方法的可靠性,同时为休药期的制定提供依据,以指导临床合理用药。1、猪组织中氟尼辛残留量的HPLC检测猪组织样品经1%三氯乙酸(TCA)-乙腈溶液提取,正己烷脱脂,PCX阳离子交换柱净化,C18色谱柱进行分离,外标法定量。流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸三乙胺溶液(60/40,v/v,pH=3.8),检测波长为333nm。氟尼辛标准工作液在0.02～5μg/mL范围内呈良好线性关系(R2≥0.999)。氟尼辛在肌肉、皮脂、肾脏、肝脏四种组织的检测限(LOD)分别为10、6、15和15μg/kg,定量限(LOQ)分别为25、10、30和30μg/kg。氟尼辛在肌肉加浓度为25、50、500和1000μg/kg时,回收率在75.5%-93.5%之间；在皮脂添加浓度为10、20、500和1000μg/kg时,回收率在78.9%-97.4%之间；在肾脏、肝脏添加浓度为30、60、500和1000μg/kg时,回收率分别在73.6%-97.1%、71.9%-98.6%之间。日内变异系数为2.28%-7.74%,日间变异系数为3.39%～7.56%。本研究建立的检测方法,其回收率、精密度、灵敏度能满足猪组织中氟尼辛残留量的检测要求。2、猪组织中氟尼辛残留量的LC-MS/MS检测猪组织样品经1%TCA-乙腈溶液提取,正己烷脱脂,PCX阳离子交换柱净化,C18色谱柱进行分离,以0.1%甲酸溶液和0.2%甲酸-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱；质谱采用电喷雾电离子正离子扫描(ESI+)方式,选择反应检测(SRM)模式检测。氟尼辛基质匹配标准曲线在0.003～5μg/mL范围内呈良好线性关系(R2≥0.99)。氟尼辛在肌肉、皮脂、肾脏、肝脏四种组织的检测限(LOD)为0.6μg/kg,定量限(LOQ)为1μg/kg。氟尼辛在肌肉、皮脂、肾脏、肝脏添加浓度为1、10、500、1000μg/kg时,回收率分别在77.5%-91.5%、74.3%～94.8%、71.7%-91.4%、71.9%-98.6%之间,日内变异系数4.84%-8.64%,日间变异系数4.86%～10.03%。本研究建立的检测方法,其回收率、精密度、灵敏度能满足猪组织中氟尼辛残留量的检测要求。3、氟尼辛在猪体内残留消除研究25头商品杂交猪,按2mg/kg b.w(以氟尼辛计)的剂量肌注复方氟苯尼考注射液,间隔48h后再注射一次,分别于停药后第1、6、11、16、21天共5个时间点进行采样。利用已建立的猪组织中氟尼辛残留量的HPLC检测方法,测定该复方制剂中氟尼辛葡甲胺在猪组织中的标示残留物——氟尼辛的残留量。停药后1天氟尼辛在猪各组织中的残留量以注射部位和肝脏最高,分别为(0.579±0.168) mg/kg和(0.447±0.190) mg/kg;其次为肾脏(0.259±0.125) mg/kg;肌肉和皮脂最低,分别为(0.050±0.003) mg/kg、(0.031±0.015) mg/kg。研究表明：停药后该复方制剂中氟尼辛在肌肉和皮脂中消除最快,注射部位和肾脏次之,肝脏最慢,说明肝脏是氟尼辛的残留靶组织。氟尼辛在肌肉、皮脂、注射部位、肾脏、肝脏组织中的残留量分别于停药后第6、6、11、11、16天时全部降至检测限以下。根据EMEA对氟尼辛在猪肝脏中残留限量(MRL)规定,将实测数据采用WT1.4计算软件拟合,结果显示氟尼辛在肝脏中的休药期约为7.51天；根据FDA对氟尼辛在猪肝脏中残留限量(MRL)规定,将实测数据采用WT1.4计算软件拟合,结果显示氟尼辛在肝脏中的休药期约为15.35天。鉴于以上结果,建议复方氟苯尼考注射液2mg/kg b.w：以氟尼辛计)肌肉注射,两次间隔48h给药,此复方中氟尼辛在猪的休药期为16天。