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目的:通过建立豚鼠到大鼠腹腔心脏移植模型,采用豚鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)修饰胸腺的方法预处理受体。研究胸腺修饰对受体自身免疫调节以及对异种移植免疫排斥反应的影响,探讨异种心脏移植免疫排斥机制。方法:取豚鼠MSCs进行分离纯化体外扩增至第三代,然后对大鼠进行胸腺修饰。并观察大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的数量变化。供体豚鼠和受体SD大鼠各20只随机分成四组,A组(对照组):仅行豚鼠到大鼠腹腔心脏移植;B组(胸腺修饰IT组): MSCs胸腺注射后第15天行豚鼠到大鼠腹腔心脏移植;C组(CVF组):移植前受体24小时腹腔注射CVF40u/kg,手术前下腔静脉注射CVF 60u/kg ;D组(IT加CVF组):MSCs胸腺注射后第14天在受体腹腔注射中华眼睛蛇毒因子(CVF)40u/kg(即0.4mg/kg),24小时后心脏移植手术时下腔静脉再次注射CVF60u/kg。观测指标:移植心脏的存活时间、病理改变,脾脏GATA-3,CCR3变化、供受体淋巴细胞毒性试验。结果:(1)胸腺修饰后大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量第一周即开始升高,至第八天达到最高值,至第三周又降至正常水平。(2)供心平均存活时间(MST):A组23±8分钟,B组23.8±9.31分钟,C组333.8±48.33分钟,D组450.2±50.03分钟。A与B组组间比较P﹥0.05。C、D组平均存活时间延长较A、B明显延长P<0.05,D组与C组相比较具有明显差异P<0.05。(3)供受体异种混合淋巴细胞反应(XMLR),测得光密度值(OD值)分别为:胸腺修饰(D)组:382.2±12.03 ,对照组(A):589±15.56,胸腺修饰组明显低于对照组,P< 0.05。(4)脾脏GATA-3的表达(western-blot),测得灰度值分别为:A组:80.89±1.50,B组:81.73±1.98,C组:153.78±8.40,D组:115.60±3.11。D组较C组表达弱,且P< 0.05。(5)脾脏CCR3免疫组化:C组较D组表达明显增强。结论:1、豚鼠MSCs胸腺修饰过的大鼠,能够升高CD4+CD25+调节性T细胞,调节受体自身T细胞。2、在豚鼠到大鼠心脏移植模型中,豚鼠MSCs修饰大鼠胸腺,联合使用CVF可以延长移植物存活时间,但不能完全克服AVR的发生。3、豚鼠MSCs修饰大鼠胸腺能抑制Th2细胞的增殖,抑制大鼠IgG类诱生异种抗体产生,从而延长移植物存活时间。