酸驼奶中产细菌素乳酸菌的分离及细菌素特性

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酸驼奶是我国新疆和内蒙古等地区特有的发酵乳制品之一,其独特的风味和营养价值,深受消费者青睐。本文从新疆酸驼奶中筛选分离产细菌素菌株,在此基础上,分离纯化其所产细菌素,研究其特性,主要研究结论如下:1.通过牛津杯双层平板扩散法筛选出一株抑菌效果最好的菌株TN-2,经16SrDNA序列分析鉴定为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),相似度达99%。2.采用硫酸铵沉淀、凝胶柱层析、阴离子交换层析和反相高效液相色谱分离纯化TN-2菌株所产细菌素。SDS-PAGE电泳显示该细菌素的表观分子量在5-10kDa之间,质谱结果确定该细菌素的分子量为6352Da。3.该细菌素在pH2.0-12.0的范围内都有抑菌活性,经121℃处理20min后活性并未完全丧失。对蛋白酶敏感,例如木瓜蛋白酶和胰蛋白酶等。4.以22株食源性致病菌和耐药菌(包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌)为指示菌进行抑菌实验,结果表明该细菌素对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有抑制作用,是具有广谱抑菌作用的细菌素。对大肠杆菌(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923)的最小抑菌浓度分别为2.5和5mg/mL。5.细菌素的氨基酸组成分析结果表明CaseicinTN-2中的主要氨基酸是天冬氨酸(Asp)、苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、苯丙氨酸(Phe)、赖氨酸(Lys)。6.扫描电镜和透射电镜研究细菌素对指示菌的作用,结果表明孔洞的形成和细胞质细胞膜的改变可能是导致指示菌致死的原因。
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