黄瓜DNA伏安传感器制备及应用研究

来源 :湖南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:play5
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文在查阅大量有关生物传感器、植物DNA的提取与纯化以及DNA酶切等文献的基础上,研究了黄瓜DNA伏安传感器的制备及其应用。取得如下重要成果: 1.改进了植物DNA的提取方法.优化了用SDS法提取黄瓜DNA的条件。用4.0mL细胞提取液、0.6倍样液体积的酚/氯仿/异戊醇、0.6倍样液体积的氯仿/异戊醇、0.58倍样液体积的异丙醇及1.0 ml饱和KCl溶液,可从每克黄瓜中提取350 mg DNA。在此优化条件下提取黄瓜DNA产率高,纯度好;与已有提取方法相比较,本法有毒化学品用量显著降低。 2.采用电泳法纯化黄瓜DNA的优化条件:琼脂糖凝胶浓度为1.0%,凝胶厚度为4 mm,电泳缓冲溶液pH值为8.0,离子强度为0.050,电压为60 V。用琼脂糖包埋—小室电洗脱纯化DNA方法获取纯度更高的DNA。 3.采用Hind Ⅲ限制性内切酶降解所提黄瓜DNA,使之片断大小适合制备DNA传感器,显著改善了DNA传感器的重现性等性能。 4.以十八酸修饰的碳糊电极作基体传感器,制备了黄瓜DNA伏安传感器。优化了用所制备的传感器测定黄瓜DNA的条件,基本传感器的组成为:碳粉60%,十八酸5.0%,液体石蜡35%;光滑镜面抛光电极;ssDNA在基体传感器表面上固定条件为:表面活化液中含7.0mmol/LEDC,8.0mmol/LNHS,0.050mol/LNa2HPO4,pH为6.0,用量为100 μL;ssDNA固定液中含5.0 μg/mL变性DNA,0.010mol/LNa2HPO4,pH为6.9,用量为100 μL;DNA杂交和分析测定在含0.020mol/LNaCl5.0 mmol/L Tris,90 μmol/L Co(bpy)3(ClO43配合物,pH为7.0的杂交液中反应30min。在优化条件下,黄瓜DNA伏安传感器的线性范围为0.010 μg/mL—0.090 μg/mL,检测下限为2.97ng/mL,相对标准偏差为1.80%。本类传感器可用于生物物质种属鉴定,在司法工作中有广泛应用前景。用所提出的方法测定了本室提取的黄瓜DNA样品,回收率在98%—104%之间。循环伏安法结果表明Co(bpy)3(ClO43配合物嵌入双链DNA后,在伏安传感器上发生的电化学反应为可逆反应。
其他文献
第一章简要介绍了同时具有氧离子和电子导电混合导电材料的应用前景、发展现状及相关理论。第二章介绍了CaFeTiO材料的制备、电学性能和氧渗透性能及机理。第三章介绍了LaSrC
通过分子间作用力将两种以上的分子构筑成结构新颖具有特定功能的超分子化合物是现代化学中的研究热点。吡啶脲类配体既可以通过吡啶环上的氮原子与过渡金属配位构筑结构新颖的配合物,又可以通过脲基或质子化的吡啶盐与阴离子形成氢键作用,从而达到识别阴离子的功能作用。基于此,本论文设计合成了6种吡啶脲类配体,然后,将配体与过渡金属或含氧酸配位,获得了6个过渡金属配合物和5个阴离子配合物,对其结构进行了表征,并获得
用电聚合法制备分子印迹已有报道。通过调节聚合速度和聚合时间可以得到不同疏密程度的电聚合膜,并且电聚合膜可以在任何形状和大小的导电电极表面上形成。然而电聚合膜在分子
铀是一种具有天然放射性的元素,进入生物体内会严重影响生物的健康,甚至诱发各种突变。伴随核工业的快速发展,产生的含铀放射性废水的数量越来越多,对自然环境和人类健康构成潜在威胁。因此,探索低能耗、快速高效的处理放射性废水的方法已成为当务之急。基于金属氧化物、水合氧化物及其氢氧化物的吸附方法,是用于海水提铀、处理含铀废水等工艺的常用方法。研究表明,影响吸附活性的因素较多,如形貌、晶粒大小、晶相及结晶程度
胆红素(Bilirubin,BR)为牛黄中的主要成分,在很长一段时间里被认为是人体内的一种有毒物质,但近来人们逐渐认识到,生理浓度的胆红素(5-17μmol·L)也是人体中一种能清除自由
电子传递反应在生物体的光合作用、呼吸作用、药物代谢以及其它一些生化途径中具有重要地位,研究蛋白之间电子传递的机制、调控因素等一直是化学生物学领域的重要课题.细胞色
该论文中我们通过蒸发微乳液体系的溶剂,制备出由约7nm的纳米粒子聚结而成的亚微米级六角形单晶氧化锌超结构粒子,并获得六角形亚微米粒子的自组装有序阵列.我们利用透射电子
该文运用双道原子荧光光度计、紫外分光光度计、荧光光度计、等离子体诱导仪(ICP)和奥林巴斯显微镜照相系统等仪器在细胞水平检测缺硒对大鼠心脏病理形态学的影响和对SOD、GS