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多氧霉素(polyoxin)又名多抗霉素,由可可链霉菌阿苏变种(Streptomyces cacaoi var. asoensis)发酵产生,主要为多氧霉素A和多氧霉素B两种成分,但多氧霉素A几乎没有活性;而多氧霉素B(polyoxin B)是一类广谱的抗真菌农用抗生素,由于它是一种高效、低毒、无环境污染的安全农药,所以被广泛应用于粮食作物、特用作物、水果和蔬菜等重要病害的防治。在抗生素发酵过程中产物检测方法的建立是一个重要环节。目前已报道的多氧霉素B的检测方法主要为HPLC法。这种方法结果准确,但在发酵生产中不便于对高产菌株进行大量初筛以及对发酵过程中的产物进行动态监控。本文建立了一种在可可链霉菌阿苏变种的发酵过程中对其发酵主要活性产物-多氧霉素B的生物学快速定量检测方法,用皮状丝孢酵母菌(Trichosporon cutaneum)作为生物鉴定的指示菌,并同时对发酵液用HPLC检测,以比较两种检测方法的优越性。结果表明,生物学检测法测试精确、操作简单、原料价廉。在建立起生物学定量检测方法后,本文利用统计学方法对菌株的培养条件进行优化。首先利用Plackett-Burman设计,对黄豆饼粉;可溶性淀粉;葡萄糖;酵母粉;KH2PO4;CuCl2;CaCO3和温度八个因子进行分析,筛选到影响发酵产量的三个重要因子:黄豆饼粉,CuCl2和温度。然后利用最速上升实验和响应面分析实验对这三个因子进行优化,结果表明,当黄豆饼粉为3.27% (w/v,下同),CuCl2为0.063%,温度为33℃时,多氧霉素B的产量由173.5 mg/l提高到311.5 mg/l(72小时),产量提高了近80%。在用摇瓶发酵实验确定最佳培养条件后,用实验室小型发酵罐(3L)扩大培养,装液量为2L,考察不同初始KLa值对发酵产物的影响以确定一个合适的氧供应条件,最终确定当初始KLa为92/h,此时转速为500rpm,通气量为1vvm,多氧霉素B产量达到最大值为378.6 mg/l。以上研究结果为工业化放大生产多氧霉素B提供了良好理论依据。