小干扰RNA抑制人舌癌Tca8113细胞VEGF表达对VEGF-C及其受体表达的影响

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目的探讨针对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人舌癌细胞株(human tongue squamous cell carcinoma cell line,Tca8113)表达后,对血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)、血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)mRNA表达的影响。方法将两对特异性针对血管内皮生长因子(VEGF)的siRNA真核表达载体(PU-VEGF-siRNA1,PU-VEGF-siRNA2)经脂质体Lipofectamine 2000转染人舌癌Tca8113细胞,经G418筛选后获得稳定表达的细胞株,以转染空载体组做实验对照组,以未转染的舌癌细胞作空白对照组。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测各组舌癌细胞株中VEGF、VEGF-C、VEGFR-3 mRNA的表达情况。结果与实验对照组和空白对照组相比较,转染PU-VEGF-siRNA载体后Tca8113细胞的VEGF mRNA表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),实验对照组和空白对照组相比较VEGF mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。实验组与对照组VEGF-C、VEGFR-3的电泳条带亮度相似,各组细胞的VEGF-C mRNA的表达差异无统计学意义(P=0.845)。各组细胞的VEGFR-3 mRNA的表达差异无统计学意义(P=0.980)。结论VEGF-siRNA在体外能有效抑制人舌癌细胞VEGF mRNA的表达,VEGF表达的下调对VEGF-C和VEGFR-3 mRNA的表达无影响。
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