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目的： 在课题组前期研究的基础上，构建稳定过表达fancd2os基因的小鼠睾丸间质细胞（TM3）模型，分析fancd2os过表达对紫外（UV）诱导TM3细胞凋亡的影响；同时采用RNA干扰策略沉默fancd2os基因观察UV诱导TM3细胞凋亡的变化；并探讨fancd2os促进TM3细胞凋亡的可能机制；借助fancd2os过表达模型及fancd2os沉默分析TM3睾酮分泌的改变；为深入研究该基因在精子发生中的具体作用提供线索。 方法： 1. 过表达慢病毒载体瞬时感染HEK293T细胞；采用RT-PCR和Western blotting检测fancd2os在HEK293T细胞中的表达情况； 2. 建立稳定过表达fancd2os的TM3细胞模型；采用RT-PCR和Western blotting检测fancd2os mRNA和蛋白质的稳定表达； 3. 通过间接免疫荧光染色观察FANCD2OS蛋白在TM3中的定位分布； 4. 采用UV照射诱导TM3细胞凋亡，利用Western blotting检测过表达fancd2os后TM3凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3、BAX、BCL-2和BCL-XL的变化； 5. 将fancd2os干扰慢病毒载体转染TM3；并采用RT-PCR和Western blotting检测fancd2os mRNA和蛋白质的表达； 6. 利用Western blotting检测fancd2os沉默后TM3凋亡相关蛋白BAX、BCL-2和BCL-XL的表达变化； 7. 分别加入caspase-8/9抑制剂，借助Western blotting分析caspase-3的表达情况； 8. 采用ELISA分别检测过表达及沉默fancd2os后TM3睾酮水平的变化。 9. 采用ELISA检测过表达后加入凋亡抑制剂睾酮水平的变化。 结果： 1. RT-PCR和Western blotting结果表明fancd2os慢病毒载体在HEK293T细胞中过表达，表明慢病毒载体构建成功； 2. RT-PCR和Western blotting结果表明fancd2os慢病毒载体在TM3细胞中过表达，fancd2os过表达TM3稳定细胞模型构建成功； 3. 细胞免疫荧光染色分析显示FANCD2OS蛋白主要分布在TM3细胞的胞质中； 4. Western blotting检测结果显示fancd2os稳定过表达组Cleaved-Caspase-3和BAX蛋白的表达水平明显高于对照组（P<0.01），而BCL-2和BCL-XL的变化蛋白表达水平显著低于对照组（P<0.01），差异具有统计学意义； 5. RT-PCR 和 Western blotting 结果表明转染 fancd2os 干扰载体后 TM3 中fancd2os表达降低； 6. Western blotting检测结果显示fancd2os沉默组BAX蛋白的表达水平明显低于对照组，而BCL-2和BCL-XL蛋白表达水平显著高于对照组，差异具有统计学意义； 7. Western blotting检测结果显示加入Caspase-8抑制剂后Caspase-3蛋白的表达下降； 8. ELISA检测结果显示fancd2os稳定过表达组睾酮含量明显低于裸细胞组和空载体组（P<0.05）；而fancd2os沉默组睾酮含量明显高于裸细胞组和空载体组（P<0.01）。 9. ELISA检测结果显示加入Caspase-8抑制剂后fancd2os稳定过表达组睾酮含量明显高于对照组及加入Caspase-9抑制剂组。 结论： 1. 成功建立了fancd2os稳定过表达TM3细胞模型。 2. FANCD2OS蛋白对UV诱导TM3细胞凋亡具有促进作用且主要通过死亡受体通路发挥作用。 3. fancd2os基因可能抑制TM3细胞睾酮的分泌，并且这种抑制睾酮分泌是由于促进睾丸间质细胞凋亡引起的。