双氢青蒿素通过调节TGF-β/Smad通路改善小鼠接触性皮炎

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背景:接触性皮炎是最常见的皮肤疾病之一,是由过敏性半抗原引起的皮肤炎症性反应,影响着全球约15%~20%的人口。由于日常生活中过敏原种类多样,难以预防,且传统药物治疗副作用较大,停药后易复发等问题,对患者的生活和心理造成了极大困扰。近年来,中药低毒性、多靶点的特点,在接触性皮炎的治疗中展现出了较为理想的治疗效果,双氢青蒿素作为青蒿素衍生物的一种,在抗炎和免疫调节等方面,已经被证明有较强的功效。因此,我们研究了双氢青蒿素对接触性皮炎小鼠模型的影响及其可能的作用机制,为接触性皮炎的治疗提供新的思路和研究数据。目的:明确双氢青蒿素对小鼠接触性皮炎的抑制作用,并初步探索其可能的作用机制。方法:将BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、双氢青蒿素低剂量组(50mg/kg/d)和高剂量组(100mg/kg/d)。在小鼠腹部涂抹0.5%的2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)连续两天,对其进行致敏。5天后用0.25%的DNFB涂抹小鼠左耳诱导发敏,右耳涂抹丙酮和橄榄油混合液作为对照,致敏前2天开始双氢青蒿素灌胃处理。每天观察并记录小鼠体重和耳朵厚度变化;H&E染色和免疫组织化学染色观察组织病理学改变;流式细胞术分析皮肤和脾脏中炎症细胞的浸润情况;酶联免疫吸附实验和免疫印迹法分别检测血清中炎症细胞因子及皮肤中Smad相关蛋白的表达情况。结果:大体变化结果显示,与正常组相比,模型组小鼠耳朵皮肤肿胀明显,伴有明显的红斑和充血,双氢青蒿素处理后症状得以显著改善,且具有统计学差异;脾脏指数分析结果显示,与正常组相比,模型组小鼠脾脏指数升高明显,双氢青蒿素用药后显著下降(p<0.05);组织病理学结果显示,双氢青蒿素处理可明显抑制接触性皮炎小鼠皮肤增厚和炎症细胞的浸润,CD4+T细胞和CD8+T细胞浸润数量明显减少。流式细胞术结果显示,双氢青蒿素处理后皮肤和脾脏中浸润的CD4+T细胞、CD8+T细胞、树突状细胞和巨噬细胞显著减少(p<0.05)。酶联免疫吸附实验结果显示,相对于模型组,双氢青蒿素处理组血清中IL-6、IFN-γ、TGF-β和MCP-1水平明显下降,且有统计学差异。此外,免疫印迹实验结果表明,双氢青蒿素处理显著抑制皮肤中Smad-2和Smad-3的磷酸化水平(p<0.05)。结论:双氢青蒿素通过减少免疫细胞的浸润和调节TGF-β/Smad信号传导抑制接触性皮炎,为治疗接触性皮炎提供新的药物选择和实验依据。
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