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目的:在一定浓度的同型半胱氨酸(Hcy Homocysteine)和成骨诱导剂两种干预条件下,观察骨髓间充质干细胞(MSCs,Mesenchymal Stem Cells)向成骨分化的影响,进而来阐述干细胞参与动脉粥样硬化(AS,Atherosclerosis)形成的机制。
方法:本实验干预因素共有两个:Hcy和成骨诱导剂(以下简称诱导剂)。共分为3组:对照组,Hcy组;诱导剂组。在7d时采用逆转录酶链式反应检测培养MSCs内骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达量;8d时对MSCs进行OPN免疫组化染色。
结果:7d时三组均表达OPN,对照组MSCs的OPNmRNA相对表达量为4.35±0.34,Hcy组OPNmRNA相对表达量为4.99±0.10,而诱导剂组表达OPN最强,为5.89±0.17,三者相比,Hcy组和诱导剂组OPNmRNA相对表达量强于对照组(P<0.05);诱导剂组OPNmRNA相对表达量强于Hcy组(P<0.05)。8d时细胞爬片经免疫组化显示诱导剂组着色深,可见大量阳性细胞,Hcy组着色浅,有少量阳性细胞,对照组无着色,未见阳性细胞。
结论:在同型半胱氨酸和成骨诱导剂两种干预条件下,Hey诱导MSCs成骨作用较弱;诱导剂组诱导MSCs成骨作用强;在相同条件下,Hcy诱导MSCs成骨作用较诱导剂组弱,从而推断MSCs参与血管动脉粥样硬化异位钙化的形成。