BDNF通过mTOR信号通路上调CCI大鼠脊髓背角NR2B的表达参与神经痛的维持

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目的BDNF在神经病理性疼痛中发挥重要的作用,BDNF在神经病理性疼痛中的作用机制尚不明确。本实验探讨内源性BDNF是否通过mTOR信号通路上调CCI大鼠脊髓背角NR2B的表达参与神经病理性疼痛的维持。方法健康雄性SD大鼠35只,随机分为7组,每组5只:①正常对照组:大鼠不做处理;②CCI模型组:分离左侧坐骨神经并结扎;③假手术组:分离左侧坐骨神经不结扎;④DNF抗体组:CCI术前30min开始鞘内给予BDNF抗体,每天1次,连给7天;⑤生理盐水组:在给予BDNF抗体的相同时间点鞘内给予生理盐水;⑥雷帕霉素组:CCI术前30min开始鞘内给予雷帕霉素,每天1次,连给7天;⑦MSO组:在给予雷帕霉素的相同时间点鞘内给予DMSOo鞘内置管3天成功后建立CCI模型。CCI术后第8天取腰段脊髓标本分别做形态学观察和分子生物学分析。结果1.大鼠行为学结果:各实验组大鼠基础痛阈值PWMT和PWTL组间均无差异(P>0.05)。正常对照组和假手术组各时间点组内比较PWMT和PWTL均无差异(P>0.05); CCI模型组、生理盐水组及DMSO组术后第1天PWMT和PWTL开始下降(P<0.05),持续到第七天.与CCI模型组比较,BDNF抗体组和雷帕霉素组术后各时间点PWMT和PWTL升高(P<0.05)。2. p-mTOR蛋白和NR2B蛋白免疫组化结果:p-mTOR蛋白和NR2B蛋白主要在脊髓背角浅层表达。正常对照组和假手术组,组间无显著性差异(P>0.05);与正常对照组相比,CCI模型组、生理盐水组和DMSO组蛋白表达明显增加(P<0.05);与CCI模型组相比,BDNF抗体组和雷帕霉素组蛋白表达明显下降(P<0.05)3. p-mTOR蛋白和NR2B蛋白Western blot结果:p-mTOR蛋白和NR2B蛋白在正常对照组和假手术组之间比较,组间无显著差异(P>0.05);与正常对照组相比,CCI模型组、生理盐水组及DMSO组蛋白表达明显增加(P<0.05);与CCI模型组相比,BDNF抗体组和雷帕霉素组蛋白表达明显下降(P<0.05)结论1.内源性BDNF参与神经病理性疼痛的产生和维持,BDNF抗体可以减轻CCI大鼠的疼痛;2.内源性BDNF通过mTOR信号通路上调CCI大鼠脊髓背角NR2B的表达,参与神经病理性疼痛的维持。
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