论文部分内容阅读
背景目前糖尿病的发病率在世界范围内逐年攀升,糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)作为其主要的微血管并发症之一,严重影响患者的生活质量及疾病预后。现已证实,肾小球内皮细胞-间质转化(Endothelial-Mesenchymal Transition,EndMT)是糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)的重要发病机制之一,趋化素(Chemerin)是一种最近几年新发现的细胞因子,和它的主要受体ChemR23结合后具有调节炎症因子与白细胞趋化的作用。近期研究发现,疾病状态下异常升高的Chemerin与EndMT的关键调节因子—转化生长因子β1(Transforming Growth Factorβ1,TGF-β1)可能具有相关性。目的本文主要探讨在糖尿病肾病患者中,Chemerin/Chem R23与肾小球血管内皮细胞发生内皮细胞-间质转化的相关性。方法选择20名确诊2型糖尿病但无肾病的患者作为单纯糖尿病组(DM组),另外选择确诊糖尿病肾病的患者60例(DN组),并按患者的尿白蛋白/尿肌酐(Urinary Albumin/Creatinine Ratio,UACR)及肾小球滤过率(Estimated Glomerular Filtration Rate,eGFR)将其再分为3组,分别为:(1)DN-A组:UACR在30-300mg/g之间,eGFR≥60 ml/(min*1.73m~2)的患者20例;(2)DN-B组:UACR>300mg/g,eGFR≥60 ml/(min*1.73m~2)的患者20例;(3)DN-C组:UACR>300mg/g,eGFR<60 ml/(min*1.73m~2)的患者20例,并以20名同期的健康体检者为对照(NC组),采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测受试者血清中Chemerin、TGF-β1的含量;选取DN患者中行肾穿刺活检术的肾组织样本共8例,并以10例正常肾组织标本作对照,免疫组化法(Immunohistochemistry)检测待测肾组织中Chemerin、ChemR23、α-SMA、CD31及TGF-β1的表达;实时荧光定量PCR法(Quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检测待测肾组织中Chemerin、ChemR23、TGF-β1、α-SMA及CD31的mRNA表达。采用SPSS22.0软件对实验得到的数据进行统计学分析。当P<0.05时,认为差异有统计学意义。结果DM组及DN组患者血清中Chemerin、TGF-β1的含量均高于NC组,且二者含量均在DN组最高,Chemerin与TGF-β1在血清中的表达具有正相关性并随DN病情进展而逐渐增加;DN组患者肾组织中Chemerin、ChemR23的表达量明显高于NC组,且成纤维细胞标志蛋白α-SMA及纤维化指标TGF-β1的表达量也明显高于NC组,而内皮细胞标志蛋白CD31的表达量则明显低于NC组。同时,肾脏纤维化程度评分的结果与血清中TGF-β1含量呈正相关。PCR结果发现:DN组Chemerin、ChemR23、TGF-β1、α-SMA的mRNA表达量均高于NC组,而CD31的mRNA水平则低于NC组。结论DN肾脏纤维化程度与血清中的TGF-β1浓度有关,随DN病情进展,内皮细胞向间质表型转化,Chemerin、ChemR23可能通过调节EndMT过程参与了DN肾脏纤维化的发生发展。