电针对睡眠剥夺大鼠下丘脑内MicroRNA-132表达的影响

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目的:1.探究电针疗法对PBS(戊巴比妥钠)致眠大鼠睡眠时间的影响。2.探究电针疗法对PCPA(对氯苯丙氨酸)所致睡眠剥夺大鼠体重变化及敞箱实验中行为学变化的影响。3.探究电针疗法对睡眠剥夺大鼠下丘脑内mi RNA-132表达的影响以及对Me CP2、P300、JARID1A三个靶基因和节律基因Per1和Per2表达的影响。4.总结并探究电针改善睡眠的作用机制。方法:1.采用记录PBS致眠大鼠睡眠时间的方法,观察空白对照组、电针疗法组大鼠睡眠时间的变化。2.将32只SPF级Wistar大鼠按统计学中的随机数字表法分成四组:空白对照组、失眠模型组、安定注射组、电针疗法组。实验第一天和第二天用PCPA对除空白对照组外其他三组大鼠进行腹腔注射来建立睡眠剥夺大鼠模型,然后安定注射组连续五天每天用安定注射液对大鼠进行腹腔注射,电针疗法组连续五天每天对大鼠进行电针百会、神庭穴20分钟。实验第八天上午,对所有组别大鼠按顺序进行敞箱实验,观察并记录其穿越底面小正方形数、站立次数和在中央区域停留的时间;随即采用Real-time q PCR技术检测mi RNA-132以及其靶基因Me CP2、P300、JARID1A和生物钟节律基因Per1和Per2表达的变化。结果:1.相比于空白对照组,电针疗法组PBS致眠大鼠的睡眠时间明显增长,差异有显著性统计学意义(P<0.01);2.空白对照组大鼠较其余三组体重增加明显,安定注射组和电针疗法组大鼠经安定注射与电针治疗后较失眠模型组体重增加明显,电针疗法组大鼠的体重增加量较安定注射组大,差异均有统计学意义(P<0.05)。3.敞箱实验中,电针疗法组大鼠的平面、竖直得分较失眠模型组都明显下降,中央区域停留时间增长,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.大鼠睡眠剥夺后mi RNA-132表达上升(P<0.01),经电针治疗后mi RNA-132表达显著下降,恢复至空白对照组的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠睡眠剥夺后mi RNA-132的靶基因Me CP2、P300、JARID1A和节律基因Per1表达均下降(P<0.05),经电针治疗后各基因表达上升至空白对照组水平,甚至过表达,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠睡眠剥夺后节律基因Per2表达下降(P<0.05),经过电针治疗后,其表达量也有上升,但上升趋势不显著,无统计学意义(P>0.05)。结论:1.电针百会、神庭穴具有明确的镇静催眠作用。2.腹腔注射PCPA可成功制作出大鼠睡眠剥夺模型。3.睡眠剥夺会使大鼠体重增长受到抑制,经过电针治疗后大鼠的体重增长渐恢复正常,提示电针在调节大鼠睡眠的同时,还可能改善了其内分泌及消化系统功能。4.睡眠剥夺会使大鼠兴奋性、攻击性增强,认知能力下降;电针可以有效降低失眠大鼠的紧张兴奋性,使其对外界的认知能力增强;电针增强睡眠剥夺大鼠认知能力的作用可能是通过降低mi RNA-132的过表达来实现的。5.睡眠剥夺大鼠mi RNA-132表达升高、节律基因Per1表达下降,而电针可以下调mi RNA-132的过表达,升高节律基因Per1的表达水平,提示电针改善睡眠剥夺大鼠睡眠状况的作用机制可能与mi RNA-132、Per1基因表达量的变化有关。
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