目的 探讨同基因骨髓混合一定比例粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员的H-2半相合异基因骨髓移植是否能减轻移植物抗宿主病（GVHD），同时保留或增强移植物抗白血病（GVL）效应。 第一部分G-CSF减轻混合骨髓移植后GVHD的实验研究 方法 受鼠为雌性BALB／c小鼠及出生48～72h的BALB／c新生小鼠，供鼠为雄性(BALB／c×C₅₇BL／6)F₁（BCF₁）小鼠。BCF₁小鼠皮下注射G-CSF 0.01ug／g．d×6d。将BALB／c与BCF₁小鼠（分G-CSF动员和非动员组）脾细胞按1：1，2：1，3：1，5：1，6：1，7：1混合（细胞总数为5×10⁶／只），腹腔注入BALB／c新生幼鼠制备新生小鼠GVHD模型，结果以脾指数表示。MBMT实验分组如下： 1．对照组 （1）TBI对照组：0天全身照射（TBI）8.5Gy(⁶⁰Coγ射线)，TBI后24h内尾静脉注射生理盐水（NS）0.5ml，移植+2d腹腔注射环磷酰胺（Cy）200mg／kg。 （2）同基因移植组（Syn-BMT）：预处理当天尾静脉注射BALB／c小鼠骨髓细胞（BMC）60×10⁵／只，余同TBI对照组。 2．实验组 （1）MBMT实验组：移植程序同Syn-BMT组，BALB／c与BCF₁小鼠BMC混合比例为5：1，4：1，3：1，2：1，1：1，移植BMC总数为60×10⁵／只。 （2）G-CSF动员MBMT组：移植程序同MBMT实验组，BCF₁为G-CSF动员小鼠。 通过受鼠生存期、存活率、死亡小鼠脏器大体观察及病理学检查观察GVL效应；通过弓背、翘毛、腹泻、精神萎靡等表现和肝脏、小肠、皮肤的病理学检查观察GVHD；通过染色体C显带法检测嵌合状 H基因·臣敞混合0＊S卜动贝的11－2个相合异坯冈骨髓移怕口V卜效应的实验研究 中义摘要 态；ELISA tk坝定细胞区1于门卜－2、IL－4、IFN－Y)；流式细胞术分析T 淋巳细胞亚群变化。 结果 门)注射BALB／C与BCF；脾细胞混合比例为2卜11及11上半相合 BCF；脾细胞的新生小鼠均发生GVHD，G－CSF动员与否GVHD发生程 度差异非常显著。混合比例为7：1～3＊的幼鼠均未发生GVHD。 出同基因移植和5：1＊＊＊T组小鼠均无＊＊＊D，个1和3：1＊＊＊T组多有 个同程度 GVHD表现，2周后大多恢复常态，2：1和 1：IMBM”F组小鼠渐 有中到重度 GVHD表现，3／5～4／5小鼠死于 GVHD。G（SF动员 MBMT组小鼠8周存活率明显提高。 o）G（SF动员供鼠后T细胞总数（Thyl二”亚群）减少，T；；1；亚群 队厂。”细胞）下降显著，L汀JL／ 比值明显低于未动员组0、功．m) OG（SF动员供鼠对单向混合淋巴细胞反应（M LR）中1卜－2、IL－4。 IFN－Y生成的影响：结果IL－2、IFN－Y水平降低，IL－4水平升高。 第二部分G（SF增强混合移植后GVL效应的实验研究 方法 受鼠为雌 性 L6 ／J’鼠，供鼠为雄性（615 XBALB／C）F人6BF；川。 鼠，受鼠均在移植前 2大腹腔接种 IXIO‘L6臼血病细胞，移植当大 TBI．SGy，移植后 2大腹腔注射 Cy 200mg／kg．只。实验分组如 卜 1．对照 组 二）自然发病 组即单纯 L6臼血 病细胞注自组。 m SynEMT组：取接利。白血．病细胞的 L6 ／J’鼠，进行预处理后，尾静 脉注射同基因B MMC 60。m’／只。 2．实验组 （l）MBMT买验组：移植程序 同 Syn－BMT组，L6与 6BF；刁鼠 BMC 混合比例为 4且禾 3且，移植BMC总数为 60X10’／只。 （2 G－CSF动员 MBMT组：移植程序同 MBMT实验组，6BF；为 G－CSF 动员小鼠。 结果 门）未行 BMT的对照组在 2周内均死于白血病，SynEMT组小鼠平均存 且吕 1 ／？11）丁 较白血9 对照组显著延长（P＜0．of）。3：1和 4：IMBMT’组刁鼠的存活时间较 Syn卫MT组明显延长（P、0刀 1）。仪)OC”动员3：1和4：1＊＊＊T组，平均存活时间较未动员组明显延长（kO刀I），生存率刃显著提高。o)MBMT后 10～15d均形成混合嵌合体，嵌合比例 64％～76％，染色体分裂相比例随移棺后时间的延长，比例渐下降，死亡时比例为0。p)G(SF动员供鼠MBMT后IL上、IL4、IFN呵含量变化MBMT门4d受鼠脾细胞悬液中IL－2，IFN－Y含量卜降，IL－4含量上升。结论 1．同基因混合一定量 H《半相合异基因成分移植可减轻 GVHD的发牛。 人G(SF动员供髓鼠进一步减轻MBMT后GVHD的发生。 3．同基因骨髓混合H上半