1.抗重金属转基因棉花再生体系的研究 2.多糖铁胶囊的质量研究

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随经济和工业的发展,土壤重金属污染越来越严重,目前已经成为世界范围的污染问题。在各种土壤修复技术中,植物修复具有更多的优势,例如,修复效率高、成本低,不存在二次污染问题,可以广泛应用。野生型植物对土壤的修复能力有限,通过转基因的方法,可以提高对土壤中重金属的积累量和耐受力。棉花是一种非常重要的经济作物,含有大量纤维,在纺织业占有重要地位,还可以产棉籽油和棉籽饼等。棉花对于我国的工业和农业都非常重要。本文的目的就是经农杆菌介导法培育抗重金属转基因棉花再生体系。首先通过制备农杆菌感受态细胞的方法,将重组质粒ACBP1-PBI121转入农杆菌中,得到含目的基因ACBP1的农杆菌。然后通过试剂盒方法提取出农杆菌质粒,再跑电泳判断质粒大小,初步确定了农杆菌中已转入含ACBP1的质粒。本文选用珂字棉312进行研究,先培养出无菌苗,再切取幼苗下胚轴,用农杆菌(OD600为0.3~0.5)侵染5min,共培养三天,再脱菌培养。通过试验发现,愈伤组织诱导最佳的培养基为MSB+2,4-D 0.1mg/L+KT 0.1mg/L+蔗糖3%,添加10mg/L Vc,并将培养基中硝酸铵去除、硝酸钾加倍,有利于减轻褐化。脱菌最佳抗生素浓度为200mg/L氨苄霉素和60mg/L卡那霉素。向培养基中加入0.2mg/L IBA,有利于再生苗的生长。通过大面积种植抗重金属转基因棉花,可以达到治理土壤中重金属的目的,对环境保护具有重大意义和价值。另外,棉花作为一种经济作物,在治理环境的同时还会产生经济效益。缺铁性贫血是一种在全世界范围内都较为普遍缺铁性疾病,严重影响人类的健康。因此,研究补铁类药物意义重大。与传统补铁剂相比,多糖铁更具优势,如副作用少、易于吸收、效果好、成本低等。本课题对多糖铁胶囊进行了质量研究,这对于得到质量合格并且稳定的补铁药物有重大意义。研究内容包括性状、鉴别、检查(干燥失重、有关物质、残留溶剂、引湿性、装量差异)、含量测定及溶出度等。通过观察多糖铁胶囊的颜色和性状,发现其内容物为微丸,棕褐色,无臭,略有咸味。参照药典方法,从三个方面对多糖铁进行了鉴别,证明了多糖铁中含铁和多糖,但并非游离状态,而是存在于络合物中。检查试验结果显示,含水量小于9.0%,用高效液相----示差折光测定强制降解液确定有关物质为葡萄糖,气相色谱测得乙醇残留量不超过0.5%,具有引湿性,装量差异合格。用间接碘量法测得每粒胶囊中含铁量为150mg。建立了溶出度测定方法----邻菲罗啉分光光度法,并对溶出条件(介质、方法、取样点等)进行了探索,结果发现,90min时溶出量大于98%。通过本文对多糖铁胶囊进行质量研究,建立了检测方法并对其进行了验证,这对于得到安全有效的补铁剂有重要的意义。
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