背景与目的脓毒症是由宿主对感染反应失调而引起的多器官功能障碍,严重威胁人类健康。脓毒症发生多器官衰竭时肺脏极易受损伤,引起炎症反应和细胞的凋亡。脓毒症引起的肺损伤目前尚无确切治疗方法。本文在脓毒症肺损伤小鼠模型和脂多糖（LPS）诱导的人支气管上皮细胞（NHBE）损伤模型中探讨miR-139-5p改善脓毒症诱发的肺损伤中炎症反应的可能作用机制。方法1、苏木精-伊红染色观察盲肠结扎穿孔（CLP）诱导脓毒症致急性肺损伤（ALI）小鼠肺组织病理改变并测定肺含水量。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测脓毒症致ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）和血清中TNF-α、IL-1β和IL-6促炎细胞因子的表达,使用商用试剂盒测定肺组织活性氧簇（ROS）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽还原酶（GSH-px）表达水平。原位末端转移酶标记实验（TUNEL）检测细胞凋亡水平。用实时荧光定量（qRT-PCR）和免疫印迹（western blotting）实验检测miR-139-5p和Rho激酶1（ROCK1）表达水平。2、通过查询生物信息预测ROCK1是miR-139-5p的直接靶点,使用双荧光素酶报告基因实验加以验证。3、NHBEs在脂多糖（LPS）刺激前,使用过表达ROCK1的慢病毒载体（或空载体）和miR-139-5p模拟物或对照模拟物共转染。检测半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase-3）的转录活性,并检测粘多糖5AC（Mucin 5AC）、粘多糖1（Mucin 1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）、Nod样受体蛋白3（NLRP3）、凋亡相关链状蛋白（ASC）和半胱氨酸天冬氨酸酶1（caspasel）水平。流式细胞术检测NHBE细胞细胞凋亡情况。结果1、与正常组相比,CLP后小鼠肺组织形态异常,TNF-α、IL-1β和IL-6生成增加,活性氧簇（ROS）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）表达水平显著升高,细胞凋亡率升高,ROCK1表达水平显著升高,肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GSH-px）的表达水平和miR-139-5p的表达水平显著降低。2、双荧光素酶基因报告实验证实ROCK1是miR-139-5p的直接调控靶点。3、在NHBEs中,与未经处理的细胞相比,LPS刺激导致细胞凋亡率显著升高,炎症细胞因子表达水平显著升高。过表达miR-139-5p能够抑制LPS诱导的NHBEs中的凋亡,抑制炎症因子表达。在NHBEs中过表达ROCK1能够逆转过表达miR-139-5p所抑制的ROS活性、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）表达水平和促炎细胞因子的产生。同时发现过表达ROCK1能够恢复过表达miR-139-5p所抑制的NLRP3、ASC、caspase1、caspase-3、Mucin 5AC和Mucin 1 的表达水平。结论miR-139-5p通过抑制下游靶基因ROCK 1的表达,抑制氧化应激和炎症反应,减轻脓毒症诱导的ALI,提示miR-139-5p可能是脓毒症ALI潜在的治疗靶点。