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目的：基于胶体金免疫层析技术制备一种快速检测莲子、当归、姜粉、陈皮、西洋参、白芍中黄曲霉毒素Bi (AFB1)的试纸条,以期建立简单、快速、经济、高效的黄曲霉毒素B1的检测方法。方法：①采用酶联免疫吸附法(ELLIS A)对制备抗AFB1单克隆抗体效价评估；②采用柠檬酸三钠还原法制备纳米金颗粒,制备的胶体金溶液经目测法、透射电镜扫描法、紫外分光光度计法观察金颗粒分散均匀程度及测定平均粒径大小；③采用间接竞争胶体金免疫层析技术(Indirect competitive colloidal gold immune chromatography technology, ICGT),优化纳米金标记抗体最佳偶联浓度、金标抗体最佳偶联pH和包被在硝酸纤维素膜(NC)上AFB1-BSA(检测线)和二抗羊抗鼠IgG(控制线)浓度；④采用滴加标品溶液法,确定免疫层析试纸条的最低检测限,考察试纸条的性能(特异性、稳定性及重现性)：⑤采用试纸条检测法对市售莲子、当归、姜粉、陈皮、西洋参、白芍样品中AFB1初筛,并采用UFLC-MS/MS法分别对市售6种中药样品中AFB1的含量进行测定。结果：①试纸条制备的研究结果显示：当制备AFB1单克隆抗体浓度为3.8mg/mL,酶联免疫吸附法(ELLISA)抗体效价评估为1：1.0×104时,ICso为0.01ng/mL的时候,抗体效价良好；胶体金溶液在528nm处有最大吸收波长,金颗粒的平均粒径约为40nm；胶体金标记抗体最佳标记浓度为6μg/mL,在pH 8.2下,抗体与胶体金偶联结果最佳,NC膜上最佳吸附抗原浓度(AFB1-BSA,检测线)为0.3mg/mL,二抗羊抗鼠(IgG,控制线)最佳吸附浓度为0.5mg/mL;制备的试纸条最低检测限为2.5ng/mL,检测时间10min,对试纸条特异性的考察结果显示,其性能良好。②试纸条对6种中药中AFB1初筛结果显示：6份莲子、9份当归、23份姜粉、1份白芍、9份陈皮药材样品中,检测出AFB1。且含量超过 2.5ng/mL,10份西洋参样品中未检测出阳性样品。③LC-MS/MS定量分析结果显示：6份莲子样品呈阳性,AFB1的含量分布范围在：4.37-7.82μg/kg；9份当归样品呈阳性,AFB1的含量分布范围在：3.85-10.82μg/kg；23份姜粉样品呈阳性,AFB1的含量分布范围在：2.53-6.82μg/kg；1份白芍样品呈阳性,AFB1的含量分布范围在：2.75μg/kg；9份陈皮样品呈阳性,AFB1的含量分布范围在：2.90-10.2lμg/kg；西洋参样品中未检测出阳性样品或低于定量限。试纸条的检测结果与LC.MS/MS结果相比较,提示制备的试纸条灵敏度、稳定性良好,能够满足部分中药中黄曲霉毒素B,初步筛查的目的。结论：本研究所制备的快速检测中药中AFB 1的试纸条具有经济合理、操作简便、结果直观、灵敏度高的优点。与常规的AFB1分析方法相比,试纸条检测省略了繁琐的操作步骤和昂贵的仪器设备。能满足中药材的实时、实地快速检测目的。同时,为建立中药材中AFB1的快速筛查方法提供了参考和依据。但是,由于中药化学成分复杂,基质干扰严重,制备的免疫层析试纸条仅适用于组分与AFB1结构差异性较大中药快速检测。因此,优化示踪物标记免疫蛋白,提高试纸条检测特异性、灵敏度也是今后值得研究的重点。