研究目的构建mPGES-1-RNAi慢病毒（前列腺素E2合成酶-1-RNAi）并感染肝癌细胞,观察干扰mPGES-1基因对肝癌细胞SMMC7721和HepG₂体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。采用miRNAs芯片方法检测肝癌细胞HepG₂ mPGES-1基因被干扰后miRNAs差异表达情况,并加以验证以及相关分析,以期发现mPGES-1介导miRNAs信号通路在肝细胞癌恶性进展中的作用及可能的分子机制。研究方法（1）构建mPGES-1-RNAi慢病毒并分别感染肝癌细胞SMMC7721和HepG₂,同时设置空载体组（NC组）和未感染组（Control组）。采用Western blot、PCR等方法检测干扰mPGES-1基因前后肝癌细胞SMMC7721和HepG₂中mPGES-1mRNA及蛋白的表达水平。运用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测干扰mPGES-1基因对肝癌细胞SMMC7721和HepG₂增殖、迁移和侵袭能力的影响。（2）用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测干扰肝癌细胞株SMMC7721和HepG₂mPGES-1前后前列腺素E₂（PGE2）的含量。（3）采用miRNAs芯片筛选干扰肝癌细胞株HepG₂ mPGES-1基因后显著差异表达miRNAs,同时用qPCR加以验证,对差异表达最显著的miR-146a-5p用TargetScan、PITA、microRNAorg数据库进行靶基因预测。三个数据库取交集后的共同靶基因进行后续的GO和KEGG Pathway分析。（4）用免疫组织化学方法检测mPGES-1、cyclinD1和EGFR在肝癌组织和癌旁肝组织的表达情况,并分析它们之间的相关性。研究结果（1）成功构建mPGES-1-RNAi慢病毒并感染肝癌细胞SMMC7721和HepG₂,SMMC7721的病毒感染率约为80%,HepG₂的病毒感染率约为90%。（2）与未感染组（Control组）、空载体组（NC组）相比,肝癌细胞SMMC7721和HepG₂中mPGES-1基因干扰组（LV-2组）mPGES-1 mRNA和蛋白表达明显下调,且差异有统计学意义（P<0.05）。（3）与未感染组（Control组）、空载体组（NC组）相比,肝癌细胞SMMC7721和HepG₂中mPGES-1基因干扰组（LV-2组）PGE₂含量明显下调,且差异有统计学意义（P<0.05）。（4）CCK8实验及Transwell侵袭实验结果显示:在肝癌细胞SMMC7721和HepG₂中,mPGES-1基因干扰组（LV-2组）与未感染组（Control组）和空载体组（NC组）相比,细胞增殖、侵袭能力明显减弱,且差异有统计学意义（P<0.05）。（5）细胞划痕实验结果显示:在肝癌细胞SMMC7721中,相对未感染组（Control组）与空载体组（NC组）,mPGES-1基因干扰组（LV-2组）细胞迁移能力明显减弱,且差异有统计学意义（P<0.05）;在肝癌细胞株HepG₂中,相对未感染组（Control组）与空载体组（NC组）,mPGES-1基因干扰组（LV-2组）细胞迁移能力有所下调,但差异统计无学意义（P>0.05）。（6）miRNAs芯片筛选显著差异表达miRNAs与qPCR验证结果相对比:miR-146a-5p、miR-6889-5p、miR-3150b-3p、miR-4470表达上调;miR-20a-3p、miR-23a-5p、miR-629-5p、miR-7-1-3p、miR-6820-3p表达下调,以上结果与miRNA芯片结果相一致,其中上调miRNAs中miR-146a-5p改变最明显,上调倍数为4.12,下调miRNAs中miR-7-1-3p改变最明显,下调倍数为3.70。但miR-5191、miR-2276-3p、miR-892b表达上调,miR-521表达下调,这4个miRNAs的表达情况与芯片结果不一致。（7）差异表达最显著miR-146a-5p的靶基因预测及对靶基因的GO分析和KEGG分析结果显示:miR-146a-5p的候选靶基因有120个,有cyclinD1、EGFR等;且miR-146a-5p的靶基因主要调控基因转录、细胞转移、小GTPase介导的信号转导、脱磷酸作用、T细胞激活等生物学行为,主要富集在:肿瘤相关信号通路、Ras信号通路、Wnt信号通路、Hippo信号通路、ErbB信号通路等。（8）免疫组织化学染色结果显示:mPGES-1在肝癌组织中高表达率高于癌旁肝组织（77.78%vs.53.70%）,差异有统计学意义（P<0.05）;cyclinD1在肝癌组织中高表达率高于癌旁肝组织（12.96%vs.1.85%）,差异有统计学意义（P<0.05）;EGFR在癌旁肝组织中的高表达率高于肝癌组织（38.89%vs.72.22%）,差异有统计学意义（P<0.05）。对mPGES-1、cyclinD1、EGFR三者的相关性进行分析,结果显示:mPGES-1与cyclinD1呈正相关、与EGRF呈负相关,同时cyclinD1与EGFR呈负相关,且差异均具有统计学意义（P<0.05）。研究结论（1）成功构建mPGES-1-RNAi慢病毒载体,高效感染肝癌细胞SMMC7721和HepG₂,可稳定、显著的降低mPGES-1基因的表达。（2）干扰mPGES-1基因可以减弱肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。（3）干扰肝癌细胞HepG₂ mPGES-1基因前后miRNAs的表达谱发生改变,mPGES-1可能通过miR-146a-5p靶向cyclin D1和EGFR影响肝细胞癌的恶性进展。