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[目的]：建立大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow Stromal stem cells, BMSCs)在体外培养纯化的实验方法,检测BMSC分泌的多种营养因子：建立大鼠脊髓全横断损伤模型,并检测脊髓损伤部位部分相关蛋白的表达变化情况；将BMSC移植入全横断损伤脊髓,观察BMSC移植对脊髓损伤大鼠运动感觉功能恢复的作用,分析BMSC治疗脊髓损伤的可能机制,为BMSC移植治疗脊髓损伤的临床应用提供依据。[方法]：体外培养纯化BMSC,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫细胞化学检测BMSC中多种营养因子的表达。选取清洁级成年Sprague-Dawley(SD)大鼠,建立T10节段脊髓全横断模型,分别在脊髓损伤后1天,3天,14天,28天,使用Western Blot技术检测部分损伤相关蛋白的变化趋势。将建模成功的大鼠随机分为细胞移植组、DMEM注射液对照组和单纯全横断组(每组8只),用微量注射器抽取培养至第3代的BMSC,在脊髓横断处头尾侧缓慢注射BMSC,DMEM注射液对照组同法注射等量DMEM缓冲液,单纯全横断组只进行全横断手术。各组大鼠分别于术后每周进行BBB评分检测后肢运动功能,1月,2月,3月后进行诱发电位感觉功能检测。各数据采用单因素方差分析、t检验,对资料进行统计学分析。[结果]：1. BMSC原代培养可见成纤维样细胞集落形成,中心细胞分布较密,外周细胞呈放射状向外分布,细胞分布较密度较小。传第一,二,三代的细胞增殖活跃,可见绝大多数细胞单层贴壁生长,胞体呈梭形、椭圆形、扁平形、三角形、不规则形,折光性强,长有两个或多个突起,有的突起相互连接,可见细胞核及核仁,当细胞融合时,呈平行或漩涡状生长。MTT法测定BMSC生长情况提示2,3天增殖最快。光学显微镜下可见培养至第3代的BMSC多数呈CD29+及CD44+,阳性率分别达96.86%及94.35%。2. RT-PCR检测培养至第3代的BMSC显示：(?)GF,BDNF,NT-3,NT-4,TrkA,TrkB,TrkC,VEGF,CNTF,EGF,FGF,TGF mRNA均有阳性表达。免疫细胞化学显示同PT-PCR检测结果,各营养因子蛋白表达阳性率各不相同。NGF,BDNF,NT-3,NT-4,VEGF,CNTF,EGF,FGF,TGF主要分布于胞浆,TrkA,B,C,主要分布于胞膜及核膜。3.脊髓全横断损伤后,吡哆醛激酶蛋白和真核翻译起始因子蛋白表达量均出现损伤后先下降,后升高恢复的趋势；波性蛋白,原肌球蛋白及caspae-3表现出先升高后降低至正常水平的变化趋势。4. BMSC移植后大鼠运动及感觉功能呈现明显的升高及恢复,尤其在移植后3周及2月时间段恢复更加明显。12周BMSC移植组BBB评分可达9.3分,可见足底仅位于负重位,或频繁足底重触地,无足底负重步。BMSC移植组CSEP波幅明显增加,潜伏期缩短,P1波和N1波及P1N1波幅与手术对照组比均有统计学差异。[结论]：1.体外分离传代纯化的BMSC细胞增殖强纯度高,不但分泌多种营养因子并且可以作为理想细胞移植治疗的细胞来源。2.脊髓全横断损伤后代谢相关蛋白及转录,凋亡相关蛋白呈现一定趋势的变化及恢复。3. BMSC移植入脊髓全横断损伤大鼠后运动感觉功能显著恢复,且在3周及12周增幅明显。BMSC移植入全横断脊髓损伤大鼠后可能通过分泌多种营养因子协同发挥作用促进功能恢复,并且损伤后部分蛋白过表达或缺表达可能通过BMSC分泌的多种营养因子的协同作用加以调节及影响。4. BMSC可以作为最有潜力的干细胞用于脊髓损伤治疗并且为临床提供了可能的治疗机制及理论依据。