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目的:通过ERK1/2抑制剂(PD98059)对实验大鼠癫痫发作及Drp1表达变化的影响,探讨ERK1/2通过调控线粒体分裂参与癫痫发作的可能机制。方法:将健康成年雄性SD大鼠分为以下几组:正常组;癫痫组(0.5h、2h、6h、12h、24h六个时间点);PD98059组(ERK1/2抑制剂);Mdivi-1抑制剂组(Drp1抑制剂组);二甲亚砜对照组(DMSO组)(每组或时间点n=5);通过腹腔注射氯化锂-匹罗卡品建立癫痫模型,造模成功后,行为学评估大鼠首次发作的潜伏期及1小时之内大鼠癫痫大发作的次数(Racine评分在IV级及以上则视为癫痫大发作),通过Western blot技术检测分析ERK1/2和Drp1总蛋白及磷酸化蛋白在大鼠海马中的表达水平,免疫组化观察ERK1/2和Drp1在神经细胞中的定位。结果:1.行为学结果:正常组大鼠无癫痫发作,癫痫组首次发作的潜伏期为15.4±1.14 min,PD98059组为32.8±5.54min;Mdivi-1组为28.6±1.94min;溶剂对照组为16.0±1.58min;癫痫组1小时之内大鼠癫痫大发作的次数为9.8±0.83min,PD98059抑制剂组为5.2±0.84min;Mdivi-1组为5.6±1.14min;溶剂对照组为9.4±1.14min;癫痫组的首次发作潜伏期及1小时之内癫痫大发作的次数与溶剂对照相比,差异均无统计学意义(P>0.05);PD98059组与Mdivi-1组相比,差异无统计学意义(p>0.05);PD98059组及Mdivi-1组与溶剂对照组对比,PD98059组及mdivi-1组的首次发作潜伏期均延长,1小时之内癫痫的发作次数减少,差异有统计学意义(P<0.05)。2.HE染色结果:正常组大鼠海马神经细胞排列规则,细胞完整,胞浆和胞核结构分明,癫痫组和溶剂对照组部分神经细胞出现核溶解、核固缩,细胞排列不规整,胞浆呈浓染,PD98059组和Mdivi-1组细胞仍有排列不规整,部分细胞裂解坏死,但程度较癫痫组及溶剂对照组轻。3.Western blot结果:正常组大鼠海马中的p-ERK1/2、t-ERK1/2、t-Drp1、p-Drp1均有基础表达;与正常组及DMSO组对比,t-ERK1/2及t-Drp1在癫痫组及抑制剂组差异无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,癫痫组大鼠海马中p-ERK1/2在0.5h后表达逐渐升高,在12h时达到高峰,在24h仍有较高表达,差异有统计学意义(p<0.05),癫痫组(12h)与DMSO组(12h)对比,差异无统计学意义(p>0.05);PD98059及Mdivi-1干预后,造模成功后第12h,PD98059组的p-ERK1/2的蛋白含量较DMSO组显著减少,差异有统计学意义(p<0.05);Mdivi-1组p-ERK1/2的蛋白含量较DMSO组差异无统计学意义;与正常组相比,癫痫组p-Drp1与t-Drp1的蛋白含量比值在大鼠海马中显著增高,差异有统计学意义(p<0.05),与DMSO组相比差异无统计学意义(p>0.05);PD98059组及Mdivi-1组较DMSO组相比,p-DRP1与t-Drp1的蛋白含量比值下降,差异有统计学意义(p<0.05)。4.免疫组化结果:t-ERK1/2、p-ERK1/2在海马神经细胞CA1、CA3中均有表达,阳性细胞呈棕黄色,t-ERK1/2在神经细胞膜上表达,p-ERK1/2在神经细胞胞浆和胞核中均有表达。t-Drp1在神经细胞中CA1区和CA3区中均有表达,阳性细胞呈浅黄色,在神经细胞膜上表达。结论:抑制ERK1/2信号通路过度激活,可通过影响Ser616位点的Drp1磷酸化抑制线粒体过度分裂进而调控癫痫发作。