药物的质量研究与质量标准的制订是药物研发的主要内容之一。药物的质量研究是药物质量标准制定非常重要的参考资料和依据。药物质量标准是保证药物质量所设定的系列检测方法和指标，是实现药物疗效稳定的基本要求，也是药物质量监控的依据。药物质量标准研究是研究控制药物质量的技术方法和各种指标，通过这些技术方法对各种指标进行检测，达到控制药物质量的目的。药物的稳定性考察为药物的有效期提供依据，同时也为药物在生产、运输、贮存以及临床使用提供重要的参考数据。本文分别从原料药盐酸苯达莫司汀的质量研究和稳定性研究两个方面对盐酸苯达莫司汀的质量进行控制，并制定其质量标准草案，为盐酸苯达莫司汀的质量标准制定提供依据。一、盐酸苯达莫司汀质量研究本文建立了盐酸苯达莫司汀原料药质量研究方法。主要从性状、鉴别、检查和含量测定四个方面对盐酸苯达莫司汀原料药进行质量研究。性状主要考察外观性状、引湿性、溶解度和熔点，试验结果表明盐酸苯达莫司汀原料药为白色至类白色疏松状粉末，无臭，味微苦，略有引湿性，在甲醇、DMSO、DMF、冰醋酸中易溶，在水、乙醇中溶解，在乙腈中微溶，在乙醚、乙酸乙酯、甲苯中不溶，熔距为148℃～151℃。分别通过化学反应法、红外分光光度法和高效液相色谱法对盐酸苯达莫司汀原料药进行鉴别，结果表明化学反应法显示氯化物的特征鉴别反应，盐酸苯达莫司汀原料药与盐酸苯达莫司汀对照品的红外吸收图谱一致，高效液相色谱图中供试品主峰和对照品主峰的保留时间一致。这三种鉴别方法专属性强，灵敏度高，重复性好，操作简便。检查项分别考察了溶液的澄清度与颜色、酸度、吸光度、有关物质检查、有机溶剂残留、干燥失重、水分检查和炽灼残渣等。结果表明，盐酸苯达莫司汀原料药水溶液澄清、无色；本品水溶液pH在3.20³.30范围内，在235nm和330nm波长处有最大紫外吸收；有关物质检查中单个杂质均低于0.1%，杂质纯度合格；有机溶剂残留检查中的有机溶剂四氢呋喃、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷和甲苯均在限度范围内，并进行了方法学研究；水分测定结果表明盐酸苯达莫司汀原料药测定过程中的水分含量为0.60%¹.50%；干燥失重结果表明，本品在105℃恒温干燥减湿重量为2.80%⁴.85%；炽灼残渣检查结果表明，本品高温炽灼后的残渣为0.15%⁰.20%。盐酸苯达莫司汀原料药的含量测定采用高效液相色谱法和非水滴定法分别进行测定。高效液相色谱法结果表明，本品含量按无水物计算，含量在99.77%¹00.76%，并进行了方法学研究，方法可行；非水滴定法结果表明，本品含量在99.75%¹00.51%，与高效液相色谱法测定结果相似，方法可行。二、盐酸苯达莫司汀稳定性研究1、影响因素试验分别在高温、高湿和强光照射下考察盐酸苯达莫司汀原料药的在不同时间段的稳定性，分别在第5天和第10天取样检测。目的是探讨药物的固有稳定性、了解影响其稳定性的因素及其可能的降解途径与降解产物，为制剂生产工艺、包装、贮存条件和建立降解产物分析方法提供科学依据。从试验结果可以看出，盐酸苯达莫司汀原料药在上述条件下吸湿不是很明显，水分增加量很少，尤其是在高温试验条件下，基本不增加，含量基本无变化，无明显的降解产物，纯度合格，说明本品固体粉末在一定条件下比较稳定。2、加速试验本试验考察盐酸苯达莫司汀原料药固体粉末在试验期间第1个月、2个月、3个月和6个月，在温度40℃±2℃、相对湿度75%±5%的条件下放置6个月的稳定性。目的是通过加速药物的化学或物理变化，探讨药物的稳定性，为制剂设计、包装、运输、贮存提供必要的资料。本试验通过分别按水分、样品含量以及有关物质分析等项目进行检测，结果表明，盐酸苯达莫司汀原料药固体粉末在温度40℃±2℃、相对湿度75%±5%的条件下放置6个月稳定。3、长期稳定性试验长期稳定性是在接近药物的实际贮存条件下进行的稳定性考察，目的是为制定药物的有效期提供依据。本试验把3批苯达莫司汀原料药在温度25℃±2℃，相对湿度为60%±10%的条件下放置9个月，分别于0个月、3个月、6个月和9个月取样，按水分、样品含量以及有关物质分析项目进行检测。结果表明，盐酸苯达莫司汀原料药固体粉末在温度25℃±2℃，相对湿度为60%±10%的条件下放置9个月稳定。三、盐酸苯达莫司汀的降解产物研究1、盐酸苯达莫司汀电喷雾离子阱质谱分析本文建立了盐酸苯达莫司汀电喷雾离子阱质谱分析方法，采用离子阱质谱的多级离子碰撞裂解方式，通过主要特征碎片离子研究其裂解规律。结果表明，盐酸苯达莫司汀在正离子模式下，主要通过脱去羧基中的H₂O、CO碎片和C-5位N上的HCl、CH₃Cl和CH₂=CH₂Cl碎片的方式进行裂解，为盐酸苯达莫司汀的结构修饰及代谢研究等提供了参考依据。2、研究盐酸苯达莫司汀临床给药过程中的降解产物并对其结构进行确证。用高效液相色谱仪考察盐酸苯达莫司汀氯化钠水溶液（0.5mg/mL）室温条件下随时间增加的降解情况，再用高分辨率的Thermo Scientific LCQ Fleet LC/MSⁿ系统进行多级质谱扫描，获得分子量信息，最后使用高分辨率和高灵敏度的Thermo Scientific QExactive LC/MS²系统获得元素组成，确证降解产物结构。结果随着时间增加，降解产物HP1和HP2的量随着盐酸苯达莫司汀氯化钠水溶液在室温条件下放置时间增加而逐渐增加，通过LCQ Fleet LC/MSⁿ分析获得降解产物HP1和HP2的分子量分别为339和321，再通过高分辨质谱Q Exactive分析，获得降解产物HP1和HP2的元素组成分别为C₁₆H₂₃O₃N₃Cl和C₁₆H₂₄O₄N₃，进一步确证了降解产物HP1和HP2的结构。盐酸苯达莫司汀临床给药过程中容易发生降解，产生一羟基取代降解产物HP1和二羟基取代降解产物HP2，建议临床上应在最短时间内配制和使用盐酸苯达莫司汀注射液，才能保证盐酸苯达莫司汀的安全和疗效。