绿茶中茶多酚的抗肿瘤、防衰老、防辐射等作用已得到国内外相关研究证实,研究表明茶多酚中含量和生物活性最高的EGCG最引人注目。因此,本文对EGCG提纯方法进行了系统优化,并用分子光谱法研究了EGCG与BSA的结合机理。1、将咖啡因沉淀分离法、溶剂萃取法和中压硅胶柱层析分离法相结合,建立了从绿茶中提取出高纯度的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的纯化方法。经过条件优化所得最佳条件为:沉淀剂咖啡因最佳浓度为30 mmol L-1,萃取剂为乙酸乙酯,闪烁硅胶柱层析分离法所用洗脱剂组成为乙酸乙酯、石油醚、三氟乙酸的体积比为3:2:0.025。得到EGCG和ECG色谱纯度分别为97.67%和95.43%。2、首次用光谱法研究了疏水和氢键作用促进EGCG与白蛋白的相互结合的分子机理。在模拟生理条件下,研究了EGCG与BSA结合体系的紫外和荧光光谱特性;用荧光猝灭法测定了EGCG与BSA的结合常数K为2.18×105 L mol-1,结合位点数n为1,依据F?rster非辐射能量转移理论,确定了BSA和EGCG间的结合距离R为2.795nm;探讨了四种金属离子Al3+、Cu2+、Mg2+和Fe2+对EGCG和BSA结合机理的影响;同时用同步荧光光谱分析了EGCG对BSA构象的影响。