慢性乙型肝炎患者血液流变学与树突状细胞的研究

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目的:观察慢性乙型肝炎患者血液流变学状态和外周血单个核细胞来源的树突状细胞数量及表型的变化,分析血液流变学指标和树突状细胞之间的关系,以揭示二者在慢性乙型肝炎发生和发展过程中的作用,更好的指导临床治疗。 对象与方法:健康对照组21例,年龄19-48岁,平均(34.6±4.9)岁,其中男性12例女性9例,均为身体健康者。37例慢性乙肝患者,为2005年5-8月在山东大学齐鲁医院肝病门诊就诊患者。年龄18-61岁,平均(36.5±5.2)岁。其中男性23例女性14例,均符合2000年9月西安全国第十次病毒性肝炎及肝病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准。所选患者均排除了合并其它病毒感染且未有其他系统疾病,半年内未用过免疫调节剂。取空腹静脉血20ml,其中5ml采用北京世帝仪器公司生产的R-80血液粘度仪进行血液流变学指标的测定,另15ml静脉血以PBS对倍稀释后,用人淋巴细胞分离液分离出PBMC,将获取的PBMC用RPMI 1640培养液调整细胞浓度为1×107/L铺入六孔培养板,置于37℃、5%CO2培养箱中孵育2小时后吸弃未贴壁细胞。在贴壁细胞中加入适当浓度的GM-CSF和IL-4继续培养,每天观察细胞形态的变化,隔日半量换液,第五天时加入TNF-a,第七天收悬浮细胞,计数,单抗标记DC上流式细胞仪测定CD83、CD86的表达水平,并取部分细胞用3%戊二醛固定后送电镜室制备成透射电镜标本,观察DC的超微结构。应用t检验分析慢性乙肝组与正常对照组之间各指标的差异,用直线相关分析分析血液流变学指标与DC数量和表型之间的关系。
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