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黄芩苷(Baicalin,BA)是一种从黄芩根中提取的黄酮类化合物,并具有种药理作用如:抗炎、抗氧化、抗癌、肝保护、抗菌抗病毒、抗惊厥和神经保护作用等。微乳(microemulsion)是由油相、水相、表面活性剂和助表面活性剂按特定比例所形成的热力学稳定体系,它们是新的药物载体,并且能增加溶解性差的药物的溶解性。微乳凝胶(microemulsion-based gel,MEG)是在微乳中加入适宜的凝胶基质,可增加微乳的粘附性,延长药物的作用时间。急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)是因为高尿酸血症所导致尿酸盐结晶沉积于关节及其周围组织所引起红肿热痛等症状的炎症性疾病。本课题组前期制备了载黄芩苷的微乳凝胶(Baicalin-loaded in microemulsion-based gels,B-MEG)和载黄芩苷的微乳(Baicalin-loaded in microemulsion,B-ME),本文采用体内和体外实验方法,研究了 B-MEG和B-ME抗痛风性关节炎的作用和机制,并进行了豚鼠皮肤刺激性实验。1体内实验:(1)B-MEG对小鼠急性痛风性关节炎的影响。采用小鼠后足底及足背部皮下注射2%尿酸钠溶液制备急性痛风性关节炎模型。昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、B-MEG高剂量组(含1%黄芩苷)、低剂量组(含0.25%黄芩苷)和阳性对照药扶他林组,每组10只。连续给药7 d,末次给药1h后造模。结果表明,与正常组相比,模型组小鼠足部皮肤明显肿胀,皮肤病理组织检查见较多炎性细胞浸润,血清中SOD降低、MDA和H202水平显著升高,表明造模成功。与模型组相比,扶他林组在造模后1h、2h、4h、6h、1 0h和24h均极显著降低小鼠足趾肿胀率(P<0.01),B-MEG高剂量组和低剂量组在造模后6h,10h和24h显著或极显著性降低足趾肿胀率(P<0.05或P<0.01),无明显量效关系;扶他林组、B-MEG高剂量组和低剂量组均极显著降低MDA和H202水平(P<0.01);病理组织检查,扶他林组、B-MEG高剂量组和低剂量组明显减轻炎症反应。(2)B-MEG对小鼠耳廓肿胀的影响。与模型组相比,扶他林组、B-MEG高剂量组和低剂量组均极显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度(P<0.01),抑制率分别为83.9%、64.7%和74.3%。(3)B-MEG对醋酸所致小鼠扭体反应的影响。与模型组相比,扶他林组、B-MEG低、高剂量均显著抑制醋酸所致小鼠扭体次数(P<0.01),抑制率分别为61.8%、33.1%、47.5%。(4)B-MEG对豚鼠皮肤的刺激性试验。实验结果表明,在单次给药和多次给药皮肤刺激性试验中,除受药部位皮肤破损处出现皮肤粗糙外,无红斑、无水肿、无色素沉着、无出血点、无皮肤菲薄。各时间点刺激强度评分均为0,用药组和空白微乳凝胶组比较,均无统计学差异,各组动物在试验进行过程中饮食、活动均表现正常。2体外实验,B-ME对尿酸钠刺激的HaCaT细胞增殖及炎症的影响。观察不同浓度尿酸钠对HaCaT细胞增殖的影响,选择2mg/mL尿酸钠诱导细胞炎症模型,实验分为正常组、模型组、空白微乳组、黄芩苷及B-ME不同浓度组(5,10,20μg/mL),发现黄芩苷呈剂量依赖性保护炎症细胞,但B-ME无明显保护作用。综上所述,B-MEG有显著的抗炎镇痛和抗小鼠痛风性关节炎作用,其机制与其抗氧化作用有关,且皮肤刺激性小。但其降低小鼠体重,其安全性有待进一步研究。