Bacillus cereus HDYM-02产亚麻脱胶酶系及其脱胶方式研究

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亚麻脱胶是亚麻可纺纤维制取过程中关键技术环节。生物脱胶是将筛选的脱胶菌应用于亚麻原茎脱胶,通过脱胶菌分泌果胶酶、半纤维素酶降解胶质成分,进而提取纯净纤维。与传统的脱胶技术相比,亚麻生物脱胶技术具有缩短沤麻周期、提高亚麻纤维质量及降低沤麻成本等优越性,具有更广阔的应用前景。脱胶菌群数量、脱胶酶系的动态变化是生物脱胶进程的重要表征参数。本研究以分离自温水沤麻液的蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)HDYM-02为供试菌株,地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)HDYM-03,B.licheniformis HDYM-04为对照菌株,开展三个阶段的研究工作:首先,考察供试菌在牛肉膏蛋白胨培养基(BP)、果胶发酵培养基(PEC)、魔芋粉发酵培养基(KGM)、纤维素发酵培养基(CMC)产脱胶酶进程及酶系组分,进而确定供试菌脱胶粗酶液的制备条件。结果表明,B.cereus HDYM-02在PEC培养基、KGM培养基中均产果胶酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶,在PEC培养基中发酵48 h、KGM培养基中发酵72 h后,果胶酶最高活力分别为1115.1±28.7 U/mL和666.7±8.6 U/mL,显著高于对照菌(P<0.05)。B.cereus HDYM-02在PEC和KGM培养基中发酵48 h后,甘露聚糖酶最高活力分别为198.3±1.4 U/mL和3010.5±31.4U/mL,显著高于对照菌(P<0.05)。B.cereus HDYM-02在CMC培养基中产纤维素酶活力低。因此确定B.cereus HDYM-02为后续研究的脱胶菌株。然后,在PEC和KGM培养基中制备粗酶液P和粗酶液K。粗酶液P与粗酶液K中果胶酶和甘露聚糖酶性质研究结果表明,在pH值为5.0-6.0,温度为35℃-40℃条件下,果胶酶和甘露聚糖酶稳定性较好。最后,以B.cereus HDYM-02为脱胶菌,构建自然脱胶(CK)、加菌脱胶(BA)、加粗酶脱胶、加商品酶脱胶四个温水沤麻系统,并探索供试菌在亚麻脱胶实践中最佳应用方式。BA与CK对比分析表明,BA 72 h果胶酶活力、甘露聚糖酶活力和木聚糖酶活力分别为200.1±4.9 U/mL、169.4±3.0 U/mL和139.4±4.0 U/mL,显著高于CK。电镜结果显示,BA纤维表面光滑胶质去除明显。BA脱胶周期比CK缩短24 h。BA与粗酶液脱胶的对比分析表明,粗酶液P脱胶组与粗酶液K脱胶组在60 h果胶酶活力最高分别可达731.0±9.2 U/mL和490.1±19.4 U/mL,显著高于BA。粗酶液K脱胶组60 h甘露聚糖酶活力最高可达2388.6±51.2 U/mL,显著高于其它脱胶组。亚麻纤维电镜结果显示,粗酶液P组亚麻脱胶效果明显优于其他脱胶组。粗酶液P脱胶组与BA组相比脱胶时间缩短12 h。B.cereus HDYM-02在PEC、KGM产果胶酶活力和产甘露聚糖酶活力显著高于对照菌。通过粗酶液P方式进行脱胶,缩短了沤麻周期,亚麻纤维形态最佳。本研究中,B.cereus HDY-02产脱胶酶进程时间短、脱胶酶系丰富,且供试菌产脱胶酶作用条件温和、酶活稳定性好,利用该粗酶液脱胶获得了理想的效果,显示出在亚麻生物脱胶应用中潜力巨大。本课题为生物脱胶技术的推广提供了重要支撑,同时为B.cereus HDY-02在亚麻生物脱胶中的进一步应用提供了理论依据。
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