黄豆苷元代谢相关酶的分离提取及其酶学性质研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:youngpansy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物,雌马酚是其主要苷元成分黄豆苷元在人体肠道菌群作用下的代谢产物之一,比异黄酮具有更高生物学活性。目前人们已筛选出一些能将黄豆苷元直接转化为雌马酚的菌株,它们首先将底物黄豆苷元转化为二氢黄豆苷元,然后再将二氢黄豆苷元转化为雌马酚。但对于这些产雌马酚菌来说,只是比较系统的研究了它们的代谢途径,参加代谢相关的酶学证据、酶和基因方面的研究极少。课题组前期从健康成人肠道中获得一株可产雌马酚的肠道菌Slackia属菌株HY-2,该菌株能将黄豆苷元直接转化为雌马酚。本研究以菌株HY-2和代谢途径的中间产物二氢黄豆苷元为研究对象,对参与黄豆苷元到二氢黄豆苷元、二氢黄豆苷元到雌马酚转化的酶分别作了粗提取,并对提取条件作了优化,然后研究了这两种粗酶的性质。其中黄豆苷元还原酶(Daidzein reductase)能够催化黄豆苷元转化为二氢黄豆苷元,二氢黄豆苷元-雌马酚还原酶(Dihydrodaidzein-equolreductase)能够催化二氢黄豆苷元转化为雌马酚。主要结果如下:(1)研究了不同大豆食品对人体内异黄酮代谢的影响。12名雌马酚生产者在摄入不同苷元含量的大豆食品后,分别收集他们0~48h尿液并检测了尿液中异黄酮含量,结果显示尿液中雌马酚、黄豆苷元及染料木黄酮排泄量差异不显著,体内异黄酮的代谢不受大豆食品中异黄酮苷元含量的影响。(2)黄豆苷元还原酶是一种诱导型胞外酶,对菌株HY-2产黄豆苷元还原酶的培养条件进行了优化,其结果为:黄豆苷元添加量75μg/mL,培养基初始pH7.5,接种量6%,培养温度34℃,培养时间12h。经优化培养后,二氢黄豆苷元含量达到2.78μg/mL左右,比优化前提高20.9%。经硫酸铵沉淀、透析脱盐后,初步研究粗酶性质为:最适反应温度35℃,最适pH值6.5,在pH值6.0~7.5之间最为稳定,大多数金属离子对其影响较小。(3)二氢黄豆苷元-雌马酚还原酶是一种诱导型胞内酶,在提取二氢黄豆苷元-雌马酚还原酶过程中,对超声波破碎条件进行了优化。其结果为:菌体重量/缓冲液体积1/3(g/mL),工作2s,间隔8s,超声总时间15min。经优化后,雌马酚含量是2.77μg/mL。经硫酸铵沉淀、透析脱盐后,初步研究粗酶性质为:最适反应温度30℃,在pH值6.0~7.5之间最为稳定,最适pH值7.0,大多数金属离子对其影响较小。
其他文献
治国必先治党,建军必先建党。党的十八大以来,习近平同志站在全面推进党的建设新的伟大工程、加快实现新时代党的强军目标的全局高度指出,军队党的建设是军队建设发展的核心,
本文以鸡毛蛋白为原料,合成一种阳离子蛋白衍生物助剂PCEA,将其用于棉织物改性以提高棉织物对阴离子活性染料的吸附性能,解决了棉织物活性染料染色时大量使用电解质盐而引起的环
本实验以来源于猪皮的明胶为原料,采用复合酶法酶解制备胶原多肽并确定最佳工艺,通过与食品级的氯化钙螯合制备胶原多肽螯合钙并确定了最佳工艺,最后以SD雄性大鼠为实验对象,
目前,纺织用新型纤维的开发与研究方兴未艾,棉秆皮纤维作为一种新型天然纤维素纤维越来越受到重视。棉秆皮纤维属于工艺纤维,纤维的长度、纤维的细度差异较大,纤维较粗,严重影响其
在经济的高速发展和对外贸易的迅速扩大的同时,中国也遭遇了更多的非关税壁垒。目前,中国已成为世界上反倾销的最大受害国,而"非市场经济地位"已成为我国企业应诉国外反倾销
本文从关联理论、认知模式理论、图式理论、运动事件框架等理论出发,回顾了认知语言学理论在翻译研究中的运用。文中介绍了认知语言学视角下的翻译研究的现状,分析了它对翻译
“枫桥经验”从古越小镇走向之江两岸,走向全国,展现出历久弥新的魅力,成为全国政法综治战线一面高高飘扬的旗帜,成为基层检察向外推介知晓度和公信力的一张亮丽名片。时空转换,新
报纸
随着网络信息技术的发展,人们希望能够利用计算机网络技术将地域上或时间上分散的业务流程管理起来,实现统一的监控、执行和分析,从而达到规范精细化管理和节约成本的目的。
在各种复合纱纺纱技术高速发展的今天,刚性纤维复合纱纺纱却仍是一个鲜有人涉足的领域。本文首先提出了二种不同的导纱方式即包芯式和跨越式,来纺制刚性纤维复合纱,得出包芯
<正>●说转基因种子是粮食武器的人,实际上是想制造恐怖气氛,他们的目的是通过制造恐怖气氛来募集更多的资金