论文部分内容阅读
目的在模拟人体生理条件下,以三种球蛋白——牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)和溶菌酶(LYSO)作为模型蛋白,选择中药有效成分五味子甲素、五味子乙素、大黄酸、大黄素和大黄酚作为研究对象,利用光谱法和循环伏安法结合,研究中药有效成分与三种球蛋白之间的相互作用。方法采用紫外光谱法、共振光散射光谱法(RLS)和循环伏安法(CV)考察五味子甲素、五味子乙素与血清白蛋白(SA)和大黄酸、大黄素、大黄酚与LYSO作用前后紫外吸收光谱、共振光散射光谱和电化学性质的变化；利用荧光光谱法考察五味子甲素、五味子乙素与SA和大黄酸、大黄素和大黄酚与LYSO相互作用猝灭机制和相关参数,考察Zn2+等六种过渡金属离子对五味子甲素、五味子乙素与SA相互作用的影响及Eu3+等六种稀土离子对大黄酸、大黄素和大黄酚与LYSO相互作用的影响；利用同步荧光法考察五味子甲素、五味子乙素对SA和大黄酸、大黄素、大黄酚对LYSO构象的影响。结果紫外结果表明：金属离子与中药有效成分均形成1：1的复合物；紫外光谱法、共振光散射光谱法和循环伏安法结果均证实五味子甲素和五味子乙素与SA,大黄酸、大黄素和大黄酚与LYSO发生结合作用。荧光光谱结果表明：五味子甲素、五味子乙素对SA及大黄酸、大黄素、大黄酚对LYSO的荧光猝灭机制均为静态猝灭和非辐射能量转移,由热力学参数确定其相互作用力均为氢键和范德华力。五味子甲(乙)素与BSA、HSA的结合常数K、结合位点数n、结合距离r分别为3.58x104、6.42×103、1.85×104和3.97×103L·mol-1、0.944、0.993、0.815和0.700及1.53、1.65、1.60和2.18nm；大黄酸、大黄素和大黄酚与LYSO的结合常数K、结合位点数n、结合距离r分别为1.26×103、1.09×104和1.87×104L·mol-1,0.729、0.703和0.759及3.83、2.82和2.55 nm。同步荧光结果表明：五味子甲素、五味子乙素与SA及大黄素、大黄酚与LYSO的结合位点靠近色氨酸,并使色氨酸的疏水性减弱；大黄酸对LYSO的构象基本没有影响。zn2+等过渡金属离子和Eu3+等稀土金属离子对中药有效成分与三种球蛋白的相互作用产生一定影响。结论五味子甲素、五味子乙素与SA及大黄酸、大黄素、大黄酚与LYSO均发生结合作用,除大黄酸外均使球蛋白的构象发生变化。Zn2+等过渡金属离子和Eu3+等稀土金属离子均影响中药有效成分与球蛋白之间的结合力和作用力类型。