论文部分内容阅读
目的在临床工作中，百草枯中毒患者病死率非常高，其治疗办法很少治疗方向也不明确。本文从实验动物角度去探讨在急性百草枯中毒大鼠经过乌司他丁（UTI）和Sal治疗后，肺细胞中自噬和凋亡的变化。方法选用由吉林大学实验动物中心提供Wistar大鼠350只，体重(250±10)g，雌雄各半。空白对照组（Con）按雌雄各半原则随机选取。一次性给予1ml生理盐水灌胃，PQ染毒模型一次性给予PQ溶液40mg/kg灌胃造模，造模成功后，按雌雄各半原则随机将大鼠分为6组，每组各50只。治疗方案：Con组每日二次1ml生理盐水腹腔注射；PQ染毒组每日二次给予1ml生理盐水腹腔注射；PQ染毒UTI治疗组大鼠给予UTI（12万iu/kg）日二次腹腔注射；Sal（0.5mg/kg）治疗组大鼠PQ染毒后1、3、5天，每日一次给予Sa（l0.5mg/kg）1ml腹腔注射；PQ染毒Sa（l1.0mg/kg）治疗组大鼠PQ染毒后1、3、5天，每日一次给予Sal（1.0mg/kg）腹腔注射；PQ染毒UTI＋Sal（0.5mg/kg）治疗组，给予UTI（12万iu/kg），每日二次腹腔注射，在1、3、5天给予一次Sal（0.5mg/kg）腹腔注射；PQ染毒UTI＋Sal（1.0mg/kg）治疗组，给予UTI（12万iu/kg），每日二次腹腔注射， PQ中毒后1、3、5天，每日一次给予Sal（1.0mg/kg）腹腔注射。染毒后第7天留取肺脏组织，行肺部HE染色观察肺组织形态，免疫组织化学法检测肺组织LC-3和Bcl-2的表达， Westernblot检测肺组织中LC-3、Bax、Bcl-2和Caspase3蛋白的表达，行统计学分析。结果：1HE染色结果显示：Con组大鼠肺组织形态正常；PQ染毒组肺组织结构部分破坏，部分肺泡壁塌陷，部分肺泡腔扩大，局部炎细胞浸润。可见肺泡隔显著增厚，明显的局部出血；UTI治疗组肺组织结构破坏较轻；其他组别均有不同程度的破坏。2与PQ组相比，PU组中LC3A/B蛋白含量表达增高有统计学意义（P<0.05)，PS5组和PS10组中LC3A/B蛋白含量表达降低有统计学意义（P<0.05)，PUS5组和PUS10组中LC3A/B蛋白含量表达无明显变化；PU组、PS5组、 PS10组、PUS5组和PUS10组中Bcl-2/Bax蛋白含量表达增高有统计学意义（P<0.05)；与PU组相比，PUS5组和PUS10组中LC3A/B和Bcl-2/Bax蛋白含量表达降低有统计学意义（P<0.05)；与PS5相比，PUS5组LC3A/B和Bcl-2/Bax蛋白含量表达增高有统计学意义（P<0.05)。与PS10相比，PUS10组LC3A/B和Bcl-2/Bax蛋白含量表达增高有统计学意义（P<0.05)3与Con组相比，PQ组Cleaved-Caspase3蛋白含量表达增高有统计学意义（P<0.05)。与PQ组相比，PU组Cleaved-Caspase3蛋白含量表达显著降低有统计学意义（P<0.01)， PS5组、PS10组、PUS5组和PUS10组中Cleaved-Caspase3蛋白含量表达降低有统计学意义（P<0.05)；4免疫组化结果显示：与相比Con组相比， PQ组LC3和Bcl-2蛋白表达量明显降低有统计学意义（P<0.05）；与PQ组相比， PU组、PS5组、 PS10组、PUS5组和PUS10组LC3和Bcl-2蛋白表达量均有不同程度的改变；结论：急性PQ中毒大鼠肺组织发生内质网应激-自噬。UTI治疗急性PQ中毒时是通过增加肺组织自噬的发生，增加Bcl-2的表达和减少Caspase3依赖途径的凋亡来保护肺组织。而Sal降低了急性PQ中毒大鼠肺组织中细胞自噬的发生，增高了Bcl-2的表达，具体作用机制还有待于探讨。