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石油是一种能够给人们带来巨大经济利益的自然资源,但是,随着我国土壤的石油污染问题日益突出,对生态环境和人体健康造成了巨大威胁,所以,石油污染土壤的修复研究逐渐受到重视。生物修复因其经济有效而逐渐成为一种最具发展潜力的治理石油烃污染的技术。石油烃是一种复杂的混合物,单一的细菌或真菌因产生酶的种类和浓度都比较少,一般只能降解少数特定烃类或只降解到某一阶段,复杂烃类的彻底降解往往需要多种微生物协同、联合作用。
本论文针对胜利油田受高浓度石油污染的盐碱土壤,设计了利用细菌.酵母菌混合菌剂进行生物修复研究。比较不同浓度混合菌剂的修复效果,筛选出修复效果最佳的处理;进而对不同的菌种组合降解效果进一步研究,阐释细菌.酵母菌降解石油烃的协同作用机制。
1、采用浓度不同的含有三种细菌和一种酵母菌的混合菌剂修复石油污染土壤。通过盆栽实验研究CK处理以及0%、2%、4%、和8%菌剂处理土壤中的石油烃降解率、16种多环芳烃(PAHs)浓度、脱氢酶活性、pH、阳离子交换量和微生物多样性等变化进行研究。混合菌剂对石油烃的降解效果并非随着菌剂浓度的增加而一直增加。加入4%菌剂处理修复效果最佳,不仅对石油烃降解率达到73%,大部分所测PAHs浓度显著降低,其中萘、蒽、苯并(a)芘和苯并(g,h,i)芘降解率分别达到了65.5%、57.7%、74.7%和55.5%,土壤微生物数量增加,多样性更为丰富;土壤盐碱环境也得到明显改善,土壤pH稳定于6.9,阳离子交换量为201.94cmol·kg-1。
2、通过实验研究比较了生物刺激(BS)、添加细菌菌剂(BB)、添加酵母菌菌剂(BF)、添加细菌-酵母菌复合菌菌剂(BFB)对石油污染土壤的修复效果。酵母菌与细菌在对总石油烃(TPH)与多环芳烃(PAH)的降解中表现出协同作用,64天时去除率分别达到63%和32%。添加酵母菌对4~6环高分子量芳烃有很好的去除效率,在BF与BFB处理分别达到23%和32%。酵母菌与细菌的协同作用表现为生物量的增加与微生物酶活性的提高,并且非木质素酶类在降解中起主导作用。PCR-DGGE分析表明BS与BFB修复方式对土壤酵母菌与细菌的菌群结构影响显著。