论文部分内容阅读
在我国，人们的生活水平不断提高，结肠癌的发病率却在逐年上升，结肠癌的死亡率更是排在肿瘤死亡的第四位，对人们的健康产生巨大的威胁。近年来有关结肠肿瘤动物模型与分子病因学的研究正成为热点之一。YWHAZ属于14-3-3基因家族，其家族基因与肿瘤的形成有着密切的联系。有研究发现，YWHAZ基因编码的14-3-3ζ蛋白在胃癌、肺癌、肝癌等多种癌组织中表达异常。在对抑癌基因p53的研究中，YWHAZ过表达可引起p53表达量下降，进而导致肿瘤发生。本研究通过构建结肠癌HCT-8肿瘤裸鼠动物实验模型，利用RNA干扰及高表达YWHAZ基因，探讨其对结肠癌的增殖影响，为YWHAZ作为结肠癌治疗靶点提供理论依据。本研究构建了肿瘤裸鼠动物移植模型，通过RNA干扰及高表达YWHAZ基因，分别在转录水平、翻译水平、细胞增殖及肿瘤增殖等四个层面探讨YWHAZ基因RNA干扰及高表达对结肠癌HCT-8细胞及肿瘤的影响。结果显示，转染RNA干扰质粒组（pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-792pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-733pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-612、pGPU6/GFP/Neo-YWHAZ-505）YWHAZ mRNA与阴性对照组（pGPU6/GFP/Neo-shNC）相比表达量下降（P＜0.05)，转染高表达质粒组（PEF1α-IRES-DSRED-Express2-YWHAZ）YWHAZ mRNA与空载对照组（PEF1α-IRES-DSRED-Express2）相比表达量升高（P＜0.05)，空载对照组与阴性对照组比较无明显变化。转染干扰质粒组YWHAZ编码的14-3-3ζ蛋白表达量下降，转染高表达质粒组14-3-3ζ蛋白表达量升高，对照组与空白组无明显变化。转染干扰质粒组细胞较阴性对照组增殖减缓（P＜0.05)，转染高表达质粒组细胞较空载对照组增殖加快（P＜0.05)，对照组与空白组相比无明显变化。通过皮下移植，成功构建裸鼠移植性肿瘤模型，治疗结果显示，注射RNA干扰质粒组裸鼠肿瘤生长程度明显小于对照组（P＜0.05)，抑制率达57.28％，注射高表达质粒组裸鼠肿瘤生长程度明显高于对照组（P＜0.05)。