秋水仙碱对大鼠C6胶质瘤细胞抑制作用的体内体外实验研究

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目的:1.体外实验方法研究秋水仙碱对大鼠C6胶质瘤细胞生长增殖的抑制作用.2.建立可靠的大鼠脑内胶质瘤模型。3.瘤腔内注射秋水仙碱间质内化疗,观察秋水仙碱对荷瘤大鼠生存期的影响。方法:1.体外实验方法研究秋水仙碱对大鼠C6胶质瘤细胞生长增殖的抑制作用,将体外培养的C6胶质瘤细胞制成细胞悬液后接种于96孔培养板上,设调零组、对照组、秋水仙碱处理组进行研究。秋水仙碱处理组的药物浓度分别为2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625ug/ml,对照组和调零组加入等量的生理盐水。分别于培养24h、48h、72h后用MTT法测定秋水仙碱对C6胶质瘤细胞的抑制率。2.将20只SD大鼠随机分为试验组和对照组两组,实验组大鼠每只脑内接种10~6个C6胶质瘤细胞,对照组每只接种等体积的无血清的RPMI1640培养液,观察此种造模方法大鼠脑内胶质瘤的成瘤率。3.雄性SD大鼠30只,将1×10~8的C6细胞10ul接种于脑内,4天后随机分为实验组和对照组两组,实验组分别于接种后第4、7、10天立体定向下瘤腔内注射100ug/ml的秋水仙碱10ul,对照组注射等量的生理盐水,观察秋水仙碱对荷瘤SD大鼠生存期的影响。结果:1.体外MTT法的实验结果显示:秋水仙碱能明显抑制C6胶质瘤细胞的生长,而且随着秋水仙碱浓度的增大及时间的延长,其对C6胶质瘤细胞的抑制率也明显增加。当秋水仙碱浓度在2ug/ml时即能明显的抑制C6细胞的生长,抑制率达到83.9%,说明了秋水仙碱对C6胶质瘤细胞的增殖具有明显抑制作用。2.造模实验组10只大鼠中有9只在接种C6细胞后4周内死亡,一只长期生存,死亡大鼠解剖和病检均证实死于胶质瘤,对照组10大鼠均长期生存,成瘤率达90%。3.体内实验中,秋水仙碱处理组较生理盐水处理组大鼠生存期明显延长,差异有显著性(P<0.05).结论:1.秋水仙碱对C6胶质瘤细胞增殖有明显抑制作用,并且随着浓度和时间的增加,抑制作用也增大,并呈时间、剂量依赖性。2.通过向大鼠颅内接种10~6个C6胶质瘤细胞制造大鼠脑内胶质瘤模型的方法成瘤率达90%,成瘤率高,模型稳定可靠。3.向荷瘤大鼠瘤腔内注射秋水仙碱较之注射生理盐水组能明显延长大鼠的生存期。4.秋水仙碱有可能成为新的抗胶质瘤的药物。
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