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研究背景:慢性根尖周炎(Chronic apical periodontitis,CAP)是由于根管内长期存在着病原微生物的感染或刺激,引起患牙根尖周组织慢性进行性破坏的疾病。根管治疗术是目前治疗慢性根尖周炎症最有效的方法。机械预备联合化学冲洗是根管治疗过程中根管清理的主要方法,可有效的清除根管内的细菌、牙本质碎屑和坏死牙髓组织等。机械预备主要是针对含有细菌及其毒素的根管壁,但是仍有50%以上的根管壁未被预备,因此化学冲洗是必不可少的步骤。但由于根管系统具有复杂的解剖结构,根管结构中的侧副根管因为其细小的特点也常常成为机械清创和化学冲洗的盲区,联合使用次氯酸钠、氯己定和MTAD等冲洗液也不能达到彻底的杀菌功效,感染物质在根管内滞留,导致根尖周炎症长期迁延不愈。粪肠球菌通常是与持续性根尖周病变相关的分离细菌,主要以生物膜的形式存在于根管系统中。研究表明,镍钛器械预备联合5.25%Na OCl冲洗仅能清除50–75%感染根管中的细菌。为了提高对根管内致病细菌的清除效果,学者们提出使用激光活化冲洗技术辅助根管冲洗液进行根管冲洗,改善根管冲洗液在根管系统中的分布并提高冲洗效率。激光引发光声流系统(Photon induced Photoacoustic Streaming,PIPS)作为激光活化冲洗一种形式,通过饵激光器在低脉冲能量下产生剧烈的光声波冲击波活化根管冲洗液,在整个根管系统中起到高效率的三维流动冲洗的作用,该激光通过空化作用引起的流体流动的速度要比超声波搅拌时所产生的速度超出十倍。已有文献证明,PIPS在消除玷污层等方面显示出良好的前景。但是,各种不同的根管冲洗液与PIPS联合使用的抗微生物功效还不是很清楚,因此设计以下三个实验进行研究。研究目的:(1)研究PIPS联合不同冲洗液在树脂根管模型中的作用,探究适宜的根管冲洗液。(2)研究PIPS联合在不同锥度、不同宽度根管模型中的作用,探究适宜的根管锥度和宽度。(3)研究在离体牙中,PIPS联合2%Na OCl在不同根管宽度和锥度中的杀菌效果。研究方法:(1)选取240个标准树脂根管模型,拆分后分别培养2天,构建稳定的粪肠球菌感染生物模型,采用超纯水、1%、2%和5.25%Na OCl、MTAD和CHX六种不同的冲洗液联合传统手动冲洗(conventional needle irrigation,CNI)或PIPS分别对根管进行冲洗,采用ATP检测浮游细菌,荧光显微镜观察生物膜,Image Pro Plus分析平均荧光强度,探究最适宜的根管冲洗液。(2)选取480个人工弯根管模型,随机分为3组(n=160个/组),分别将其预备至#10/.02,#25/.02和#25/.06。随后,将粪肠球菌菌液注入根管内培养,#10/.02组培养7天,#25/.02和#25/.06组培养2天,建立稳定的粪肠球菌感染生物模型,采用超纯水、1%、2%和5.25%Na OCl四种不同的冲洗液联合CNI或PIPS分别对根管进行冲洗,采用ATP检测和荧光显微镜观察,Image Pro Plus分析平均荧光强度,探究最适宜的根管锥度和宽度。(3)选取23颗具有3个独立牙根的上颌第一磨牙,其中3例为阳性对照组,其余样本分为两组:CNI组(n=10)和PIPS组(n=10)。每组样本中,将近颊(MB)、远颊(DB)和腭(P)根分别预备至#10/.02、#25/.02和#25/.06。样本培养4周,2%Na OCl辅助CNI或PIPS进行根管冲洗,冲洗前后用ATP检测浮游细菌的含量。用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)和扫描电镜(SEM)对生物膜进行观察和分析。研究结果:(1)在CNI和PIPS两组中,冲洗后即刻ATP值均降低,六个亚组之间均无显著差异(P>0.05)。而同亚组之间,PIPS组的ATP含量明显低于CNI组(P<0.05)。培养6 h后,各亚组ATP值明显增加,但同亚组之间,PIPS组的ATP含量低于CNI组(P<0.05)。5.25%Na OCl+PIPS和2%Na OCl+PIPS亚组,两者的平均荧光强度在冲洗后即刻和培养6 h后均无统计学差异(P>0.05)。(2)在CNI组和PIPS组中,5.25%Na OCl亚组ATP值最低,其次是2%Na OCl,1%Na OCl,水的ATP值最高(P<0.05)。当根管锥度为0.02时,#10/.02+PIPS组的ATP值明显低于#25/.02+CNI(P<0.05)。#10+PIPS组比#25+CNI组的平均荧光强度值更小(P<0.05)。当根尖宽度为#25时,PIPS组0.02锥度的ATP值低于CNI组的0.06锥度(P<0.05),0.02锥度+PIPS比0.06锥度+CNI组的平均荧光强度值更小(P<0.05)。2%和5.25%Na OCl联合PIPS可有效提高根管冲洗后再培养6 h后的长期抗菌效果。(3)采用PIPS激活冲洗后,根管内冲洗前后ATP的清除率达98%以上。在PIPS组内,当根管锥度为0.02时,#25组的死亡率均高于#10组(P<0.05)。在PIPS组内,当根管宽度为#25时,0.02锥度组根尖部细菌死亡率明显高于0.06锥度组(P<0.05),但在冠1/3和中1/3时,其无统计学差异(P>0.05)。在冠、中、根三个区域中,#10/.02+PIPS组比#25/.06+CNI组均具有更高的细菌死亡率和ATP清除率(P<0.05)。PIPS组,在冠部均可见开放牙本质小管。研究结论:(1)PIPS辅助Na OCl根管冲洗能达到更好的冲洗效果。传统冲洗中5.25%Na OCl抗菌和抑菌效果最佳,其次是2%Na OCl。使用PIPS辅助冲洗后,5.25%Na OCl和2%Na OCl抗菌和抑菌效果达到一致。(2)与CNI相比,PIPS在更小锥度和宽度的根管内细菌的去除能力更强。2%和5.25%Na OCl在PIPS辅助活化冲洗后,能具有更好的抗菌、抑菌效果。(3)PIPS的杀菌效果优于CNI。当根管锥度为0.02时,当根管宽度由#10扩大到#25可提高PIPS在根管内的杀菌效果。当根管宽度为#25时,将根管锥度从0.02扩大到0.06对提高PIPS的抗菌效果无积极作用。PIPS能清除冠部的玷污层,开放牙本质小管。