富血小板血浆促进大鼠触须毛囊上段组织再生的研究

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目的:探讨富血小板血浆(PRP)在体内和体外条件下对大鼠触须毛囊上段组织中毛球部再生的影响。方法:(1)取SD雄性大鼠10只,麻醉满意后用改良显微分离技术钝性分离生长期的大鼠触须毛囊,用镊子挤压毛囊中段暴露红色的毛球部,紧贴其上方横向切割获得毛囊上段组织150个。(2)采用2次离心法提取大鼠的PRP,将其激活后获得PRP上清液,以不同浓度的PRP上清液加入培养基中,制备成0、5%、10%PRP三组培养液,将毛囊上段组织90个分别置于三种不同的培养液中,在37℃和5%CO2的培养箱中进行体外培养16天,每隔48h换液。(3)取毛囊上段组织60个在三组不同培养液中体外培养1天,然后分别移植到裸鼠背部皮下,4周后处死裸鼠取材。(4)光学显微镜下观察体外培养的毛囊上段组织的生长情况,组织学检测三组不同浓度下体外培养的毛囊上段组织的碱性磷酸酶活性(ALP),HE染色观察体内外毛囊上段组织的毛球部再生的变化情况,免疫组化观察体内外毛囊上段新生组织中α-SMA的表达情况,统计体内外条件下毛囊再生个数。结果:(1)在体内外条件下PRP可明显促进毛囊上段组织的毛球部再生,体外可见类似毛球部结构形成,裸鼠体内移植可见完整成熟的毛球部再生。(2)5%PRP组可明显提高体外毛囊上段组织中ALP活性,增加毛囊上段组织的再生率。(3)α-SMA在体内外新生组织中可见阳性表达。结论:PRP可以促进毛囊上段组织再生,在体外实验中5%PRP较10%PRP更优。
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