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目的：角膜新生血管（neovascularization，NV）常由损伤，炎症，感染，多次角膜眼表手术及各种病理原因所致，可导致异常愈合，视力损害，视力丧失。是一组常见的，严重致盲疾病。目前虽有多种治疗方法，但效果均不理想。因而寻找简单，有效的治疗方法，是目前眼科面临的课题之一。临床上，羊膜角膜移植及羊膜移植眼表重建均显示了其抑制角膜新生血管的作用，为理解这一作用的机制，应用可能释放多种细胞因子的羊膜培养液，对角膜上皮细胞中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响进行研究。 方法：取含有完整角膜上皮细胞的新鲜兔角膜组织（死亡时间小于2h），经2.5g·L-1胰蛋白酶+0.2g·L-1EDTA的混合消化酶处理后，刮除并收集角膜上皮细胞，以5×105个·ml-1细胞数接种到25ml培养瓶中，细胞培养至形成融合性生长。胰酶消化细胞传代，细胞分别接种于35mm培养皿及自制的羊膜培养皿上。实验分为4组，即第一组（对照组）为无血清的DMEM培养液组，第二组为去上皮的羊膜培养液组，第三组为未去上皮的羊膜培养液组，第四组为将细胞直接接种于无上皮羊膜组。每组设5个平行孔。用含15％胎牛血清的DMEM培养液培养传代细胞形成70％融合性生长后，将各组中的培养液换为无血清的DMEM培养液继续培养12h,以去处其它活性成分的影响。12h后，接种于35mm培养皿的第二组中加入去上皮的羊膜培养液，向第三组中加入未去上皮的羊膜培养液，其余两组仍用无血清的DMEM培养基培养。培养48小时后，用TRAzol法提取各组样本的总RNA，进行RT-PCR一步法反应检测各组bFGF与VEGF的mRNA表达水平并与β-actin比较。 结果：正常角膜上皮细胞均中有VEGF基因的表达，在未去上皮的羊膜培养液组（第三组）及将细胞直接接种于无上皮羊膜组（第四组）中表达均受到了明显的抑制（P＜0.001，n=5）；各组角膜上皮细胞均有bFGF mRNA的表达，各组间比较，差异无显著性。 结论:正常角膜上皮细胞中有VEGF及bFGF的表达。带有上皮层的羊膜培养液明显抑制VEGF mRNA在角膜上皮细胞中的表达。提示临床上羊膜抑制角膜新生血管的机制可能与羊膜培养液抑制血管活化因子VEGF的活性有关。具有明显的潜在的临床应用价值，值得进一步研究。