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目的:牙髓组织是由牙体硬组织包绕起来的特殊结缔组织,是由细胞和细胞间质组成,具有营养、代谢和修复等多种功能。当牙本质受到外界刺激或受到损伤时,牙髓细胞中某些前体细胞可被激活,分化成为成牙本质样细胞,形成修复性牙本质,最终矿化。如何增强牙髓细胞活性,提高细胞的分化潜能,是当前牙体牙髓病学领域研究的一个主要课题。人牙髓细胞体外原代培养体系是研究人牙髓细胞的主要体外模型,随着体外组织培养技术及组织工程技术的不断发展,国内外学者相继培养了人和多种动物牙髓组织细胞,以从细胞分子水平研究牙髓细胞的生物学特性。本实验利用组织块培养方法,从原代培养人牙髓细胞入手,旨在建立研究人牙髓细胞各种功能的良好模型,获得大量既较好的保存了源组织细胞特性,又避免受体内多种因素干扰的可供实验的种子细胞,为观察药物对人牙髓细胞体外的作用影响建立良好的技术平台。 骨碎补为中国传统骨伤科常用中药,具有补肾、活血、止痛、续骨疗伤之功效,其可促进体外成骨细胞增殖、分化、钙化。本实验首次利用骨碎补的独特的药理作用,将其作用于体外培养的人牙髓细胞,观察不同浓度骨碎补对人牙髓细胞体外诱导作用。通过检测培养细胞碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性,总蛋白合成,以及利用免疫组化方法观察细胞纤维粘连蛋白(Fibronectin,FN)合成、分泌情况,