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近年来,生物活性多糖以其诸多的生物和药理作用愈来愈引起人们的重视,研究和开发具有生物活性的多糖已成为国内外科学研究的热点。本实验室分离纯化得到了一株锦鸡儿根瘤菌(Rhizobium sp.N613),其能产生丰富的根瘤菌胞外多糖(rhizobium exopolysaccharide,REPS)。本文主要研究了REPS的体内体外抗肿瘤活性、免疫活性及流变特性等活性,希望能为REPS在医药和化工领域的应用提供一些理论依据。 在REPS抗肿瘤活性研究中,采用动物移植性实体瘤的瘤重实验法研究了REPS对小鼠肉瘤S180、小鼠肝癌腹水瘤H22和小鼠艾氏腹水瘤EAC的体内抗肿瘤作用。实验结果表明,REPS各剂量组对小鼠S180肉瘤、小鼠肝癌腹水瘤H22实体型和小鼠艾氏腹水瘤EAC实体型在体内的生长均有抑制作用,其中REPS剂量为5mg/kg、10mg/kg、60mg/kg时,REPS的抑瘤率分别达到达44.7%、55.8%、53.1%。同时,REPS各剂量组能显著增加荷瘤小鼠胸腺和脾脏的重量。随后,我们采用MTT法研究了REPS对小鼠肉瘤S180、小鼠肝癌腹水瘤H22、小鼠艾氏腹水瘤EAC和人肝癌Hep-G2细胞株在体外的生长抑制作用。实验结果表明,各剂量的REPS对以上四株细胞的体外生长均有一定的抑制作用,其中REPS的剂量为1mg/ml、0.5mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml时,REPS的抑制率分别达到了26.4%、39.5%、29.2%、30.7%。 在REPS的免疫活性研究中,通过观察REPS对荷瘤小鼠白细胞及淋巴细胞、碳粒廓清速率和廓清指数、血清抗绵羊红细胞(SRBC)抗体生成、淋巴细胞转化、对二硝基氟苯(DNFB)引发的迟发性过敏反应(DTH)的影响,研究其对机体免疫功能的作用。结果显示,REPS能显著提高荷瘤小鼠免疫器官的重量,可以促进单核吞噬细胞的吞噬作用和淋巴细胞的增殖活性,恢复对DNFB的迟发性过敏反应和促进溶血血清抗体的生成。这些结果表明,REPS能提高荷瘤小鼠的特异性免疫和非特异性免疫功能。在我们的实验中REPS的抗肿瘤活性可能就是通过提高机体的免疫反应来完成的。 对REPS流变学特性进行了研究,研究表明,REPS有良好的增稠性和触变性,其水溶液具有很高的粘度,具有剪切稀释效应,是典型的非牛顿型流体,呈现高度的假塑性,具有较为广泛的耐酸碱、耐高温和耐盐性能,在水中有较好的溶解度和透光度。此外,急性毒性测试和蓄积毒性实验,表明该多糖无毒性。 上述实验表明,REPS具有良好的抗肿瘤活性、免疫活性和流变特性,有着广泛的应用价值,并为REPS今后在医药、食品等领域的应用提供了重要的科学依据。