加权共表达网络分析确定甲状腺乳头状癌淋巴结转移和远处转移相关核心基因

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目的:甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)是最常见的内分泌恶性肿瘤,一旦出现淋巴结转移或远处转移,会严重影响PTC患者的预后,因此,寻找与PTC淋巴结转移和远处转移相关的核心基因对于PTC的诊断和治疗十分重要。材料和方法:我们在肿瘤基因图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中获得了PTC的mRNA序列矩阵和相应样本的临床信息。利用加权基因共表达网络分析(Weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)构建了共表达网络,建立了基因间相关性较高的基因模块与临床特征之间的关系。选择其中与淋巴结转移和远处转移相关性最高的模块,用cytoscape软件将模块中的基因构建互作网络(Protein-Protein Interaction Networks,PPI)并筛选核心基因。然后,通过GEO和Oncomine数据库中的数据集进行再次筛选。最后,收集86对PTC患者的癌组织与配对的癌旁组织,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验验证筛选出的核心基因在PTC中的表达情况,并分析核心基因与PTC患者临床病理特征间的相关性。结果:使用WGCNA建立了19个与临床特征相关的基因模块,其中与PTC淋巴结转移相关度最高的是品红色基因模块,与PTC远处转移相关度最高的是深蓝色基因模块。使用Cytoscape软件进行PPI可视化,并与GEO数据库中GSE3678数据集中的差异表达基因取交集,得到12个与PTC淋巴结转移密切相关的核心基因(ARNTL、CDH3、CLDN1、COL8A1、COL8A2、IL1RAP、LPAR5、PARP4、PERP、PPL、TNFRSF21和TIAM1)和10个与PTC远处转移相关的基因(LAMA2、IL6、HTR2B、HOXB3、H19、GPC3、GAS1、FOXC1、CCL17、LINC00346)。然后通过对比Oncomine数据,最终确定6个与淋巴结转移相关的核心基因(CLDN1、COL8A1、COL8A2、IL1RAP、LPAR5和GPC3)和3个与PTC远处转移密切相关的核心基因(LAMA2、GPC3和CCL17)。最后,将收集的86例PTC患者组织样本进行RT-qPCR检测,结果提示,与癌旁组织相比,CLDN1、COL8A1、COL8A2、IL1RAP和LPAR5在PTC组织中表达明显升高,而GPC3在PTC组织中的表达明显降低,以上差异均具有明显统计学意义(P<0.05),其余3个基因(CDH3、CCL17和LAMA2)在PTC癌和癌旁组织中的表达未见明显差异(P>0.05)。进一步分析了CLDN1、COL8A1、COL8A2、IL1RAP、LPAR5和GPC3与PTC临床病理特征的关系,发现上述6个基因在PTC中的异常表达均与PTC颈部淋巴结转移密切相关。另外,LPAR5在肿瘤>2cm的PTC中表达更高,而GPC3在双侧PTC组织中的表达比单侧PTC组织中的表达更低(P<0.05)。结论:本研究提取并发掘TCGA、GEO和Oncomine数据库中PTC相关数据,并在86对PTC临床标本中验证,筛选出CLDN1、COL8A1、COL8A2、IL1RAP、LPAR5和GPC3这6个与PTC淋巴结转移或远处转移密切相关的基因,为PTC的诊断和治疗提供潜在的基因靶点,为PTC转移相关分子机制的研究提供新的方向。
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背景:目前乳腺癌的发病率呈逐年增加趋势,最新数据显示,乳腺癌已超越肺癌,跃居全球肿瘤发病首位,且发病越来越趋向年轻化,极大威胁着女性健康。乳腺癌的复发转移已成为乳腺癌相关死亡的主要原因,且一部分会发生在手术10-20年后。以往研究表明,乳腺癌干细胞CSC被认为是肿瘤发生、产生化疗耐药性以及复发转移的主要驱动力,而非干细胞可以转化为干细胞维持并更新干细胞池,而且目前对于乳腺癌不同亚群细胞的功能及相关
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