背景与目的：人微小病毒B19（Human Parvovirus B19）是目前已知的微小病毒科微小病毒属中唯一使人类致病的病毒，也是动物病毒中体积最小结构最简单的DNA病毒。主要经呼吸道和血液途径传播，可引起社区局部流行。自1990年首次证实我国存在该病毒感染后，陆续报告B19病毒是我国孕妇非免疫性流产、儿童急性再障危象、急性血小板减少性紫癜等疾病的重要病因之一。孕妇感染B19病毒者较容易通过垂直传播，导致胎儿水肿、自然流产及死胎。而在我国，多数妇女血清中缺少保护性抗体，易发生该病毒的感染。现在一般诊断B19病毒感染多采用PCR与ELISA抗体检测结合的方法。在郑州地区，孕妇感染人微小病毒B19的情况尚无人报道。而且，国内尚无B19病毒全基因序列的报道，对B19病毒序列分析也不多，我国B19流行株与国外B19病毒标准株基因差异的参考数据也不甚充足。因此，本研究应用ELISA与PCR方法分别检测血清B19 IgM抗体、B19 IgG抗体和B19-DNA，从而对该地区孕妇感染人微小病毒B19做出判断。同时，从B19病毒感染流产的孕妇血清中，用PCR方法扩增并克隆出病毒全基因，进行序列分析，为国内B19病毒序列分析提供该地区的数据资料。方法：将收集的29例不明原因流产或死胎孕妇的血清设为观察组，237例正常孕妇血清作为对照组。使用ELISA方法分别检测血清标本中的B19 IgG和IgM；提取血清标本DNA，以其为模板进行PCR检测病毒感染情况。并利用统计学软件对所得结果进行统计学分析。根据GenBank发表B19的全基因序列（NC₀00883）设计7对重叠序列引物，所设计合成的重叠引物对应扩增序列的总合囊括了参考序列的全序列；利用PCR和分子克隆技术，从B19阳性的流产感染者血清标本中分别扩增出预期B19病毒的7个互相重叠的区段；将其分别与pGEM-Teasy载体连接，转化入JM109大肠杆菌中，利用氨苄青霉素抗性、蓝白筛选筛选出阳性克隆，并以PCR方法对阳性菌落进行鉴定，从而构建出含B19病毒全基因的T载体克隆，并送测序分析。结果：1．29例不明原因流产或死胎孕妇血清B19 IgG、B19 IgM阳性率分别为51.7％（15/29）、6.9％（2/29），237例正常孕妇对照组血清B19 IgG、B19 IgM阳性率分别为30.4％（72/237）、6.9％（2/29）。2．29例不明原因流产或死胎孕妇血清中B19-DNA PCR检测阳性率为13.8％（4/29）；对照组检测阳性率2.5％（6/237）。3．分别成功构建含有B19病毒7个互相重叠的片段的T载体重组克隆质粒。4．郑州市B19病毒分离株与GenBank NC₀00883比较显示仅有10个核苷酸的不同，可导致2个不重要编码氨基酸的改变。结论：血清中B19 IgG、IgM、B19-DNA阳性率与国内外报道基本一致。郑州地区孕妇中存在人微小病毒B19的感染。郑州株B19与GenBank中B19基因序列NC₀00883比较具有极高的同源性，仅存在10个核苷酸的变异，都是碱基变化，未发现碱基的插入或缺失现象，并且只有2个碱基变化导致氨基酸的改变。这与国外研究结论一致，即不同的B19病毒株之间基因变异很小。