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研究背景及目的:特发性肺纤维化(Idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种病因不明的慢性、进展性的间质性肺疾病,目前尚无足够的证据来支持任何特定的药物疗法的使用。因渐进性呼吸困难和顽固性咳嗽,IPF患者的生活质量很差。目前对其尚无有效的治疗,故IPF患者一般预后较差,确诊后的中位生存期为3–5年。据报道,IPF的发病率在全球范围内在增加,但其病理生理机制尚不明确且缺乏有效治疗,因此关于IPF的病理生理机制及其治疗药物一直是国内外研究的热点。微小RNAs(miRNAs)是一类由大约19-22个核苷酸组成的非编码RNAs,在转录后水平调控基因表达。异常表达的miRNAs,如let-7d、mi RNA-21、mi RNA-155,在肺纤维的发病机制中起重要作用。这些miRNAs对认识肺纤维化的发生机制及临床治疗提供一种新思路,有可能成为新的治疗靶点。罗格列酮(Rosiglitazone,RSG)是过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的人工合成配体,在临床上多用于治疗2型糖尿病,是一种常见的噻唑烷二酮类新型胰岛素增敏剂。近年来发现PPARγ及其配体可参与肾、肝、肺等多个器官纤维化的发生和发展。已有研究者通过不同的技术手段明确了罗格列酮在改善肺纤维化中的效果。有报道称PPARγ的合成配体可干扰TGF-β1/Smad信号途径,从而抑制TGF-β1的致纤维化作用。但罗格列酮治疗肺纤维化的分子机制仍不明确,需进一步的研究。通过本实验可观察到RSG在治疗肺纤维化过程中,是否存在miRNAs的表达异常,这种表达变化是否与TGF-β1信号系统有关,初步探讨miRNAs是否参与了RSG治疗肺纤维化的过程。方法:雄性健康Wistar大鼠54只,体重在120-130g之间,应用随机数字表法将其随机分为3组即对照组(Control组)、博莱霉素组(BLM组)、博莱霉素+罗格列酮组(BLM+RSG组),每组共18只,于后两组大鼠气管内一次性注入博莱霉素(5mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型,对照组则注入等体积生理盐水。造模24小时后给予BLM+RSG组大鼠罗格列酮(3mg/kg.d)灌胃,余2组灌入等体积生理盐水。于第7天、14天、28天3个时间点分别于各组随机取出6只大鼠处死,然后取右肺中叶行病理学观察(HE染色,Masson染色)、右肺上叶取材应用Real time RT-PCR测定肺组织mi RNA-21、mi RNA-155、let-7d的表达,并利用免疫组化检测TGF-β1的表达。采用SPSS21统计软件对试验数据进行统计学分析,以P<0.05表示有统计学意义。结果:1肺组织病理结果:7、14、28天,Control对照组肺泡结构正常,存在少许胶原纤维,7天时BLM组大鼠与Control相比肺泡炎明显(P<0.05),14、28天BLM组大鼠肺纤维化程度逐渐加重,显著高于同期Control组(P<0.05),证明肺纤维化模型复制成功。经RSG治疗后,BLM+RSG组大鼠肺泡炎及肺纤维化程度较同期BLM组明显减轻(P<0.05)。2 Real time RT-PCR结果:7、14、28天,BLM组mi RNA-21及mi RNA-155的表达水平较Control组显著增加(P<0.05),let-7d的表达水平较Control组显著减少(P<0.05);经RSG治疗后BLM+RSG组mi RNA-21及mi RNA-155的表达较同一时间点BLM组显著减少(P<0.05),let-7d的表达水平较同期的Control组显著增加(P<0.05)。3免疫组化结果:7、14、28天,BLM组TGF-β1表达水平与Control组相比明显升高(P<0.05);经RSG治疗后BLM+RSG组TGF-β1表达水平均较同一时间点的BLM组下调(P<0.05)。4 TGF-β1与miRNAs相关分析:BLM组及BLM+RSG组在7、14、28天3个时间点上mi RNA-21及mi RNA-155的表达量均与TGF-β1呈正相关(P<0.05),而let-7d的表达量与TGF-β1呈负相关(P<0.05)。结论:1罗格列酮可以减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化。2在罗格列酮治疗肺纤维化过程中,mi RNA-21及mi RNA-155的表达上调,let-7d表达下调。3罗格列酮可能是通过调节miRNAs及TGF-β1信号通路减轻博莱霉素诱导的大鼠纤维化。