日本囊对虾中钙联蛋白在抗细菌免疫中的功能研究

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钙联蛋白(calnexin,Cnx)是一个定位于内质网(endoplasmicreticulum,ER)膜上的凝集素样分子伴侣,它与另外一个凝集素样分子伴侣钙网蛋白(calreticulin,Crt)构成了一个被称为Cnx/Crt循环的专一性的成熟系统。Cnx主要在Ca2+存储、糖蛋白折叠和蛋白质合成质量控制中行使功能。最近的研究显示Cnx还在吞噬和树突状细胞免疫中有重要作用,然而Cnx在无脊椎动物先天免疫中的作用尚不清楚。在本研究中,我们在日本囊对虾(Marsupenaeusjaponicus)中鉴定了Cnx,将其称为MjCnx,并且研究了其在对虾免疫中的作用。MjCnxcDNA全长共2392bp,编码566个氨基酸。序列分析显示MjCnx包含一个113bp的5非翻译区(untranslatedregion,UTR),一个578bp含有加尾信号(AATAAA)的3非翻译区和一个1701bp的开放阅读框,MjCnx包含一个26个氨基酸残基的信号肽,一个Crt结构域和一个跨膜结构域。MjCnx在对虾的各组织中均有分布并且在受到鳗弧菌(Vibrioanguillarum)刺激后表达上调。重组MjCnx蛋白可以通过结合细菌表面的多糖结合细菌,还能够提高对虾对鳗弧菌的清除效率。通过RNA干扰实验敲除MjCnx后,对虾对鳗弧菌的清除效率降低。MjCnx是定位于内质网膜上的凝集素样分子伴侣,但是它也存在于对虾血细胞表面,MjCnx能通过识别病原相关分子模式识别入侵微生物并提高血细胞吞噬效率,从而清除侵入体内的病原。这些实验结果证明MjCnx在对虾抗细菌免疫中有重要作用。
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