干细胞因子在大鼠下颌骨缺损修复中的表达研究

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目的探讨在SD大鼠下颌骨临界性骨缺损与自愈性骨缺损修复过程中各时相点干细胞因子(stem cell factor, SCF)的表达情况,以及在两种骨缺损修复中骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)的表达情况,从而探讨出SCF在骨缺损修复过程中的作用。研究方法①在清洁级SD大鼠的双侧下颌骨分别制造临界性骨缺损和自愈性骨缺损模型,并在术后1、3、5、7、14、21d分别处死;②将从待处死动物体内取出造模区域,除去周围肌肉、筋膜等组织,置于10%福尔马林中固定12小时,再置于10%EDTA中4℃脱矿,待脱矿完成后石蜡包埋切片,利用免疫组织化学方法检测骨缺损区各时相点干细胞因子以及骨髓基质干细胞的表达情况;③将从待处死动物体内取出造模区域后,除去周围肌肉、筋膜等组织后直接置于-20℃冰箱中预冷半小时,再置于-80℃冰箱中冷冻24小时后,提取骨缺损区域的蛋白,利用VWestern印迹法检测骨缺损区各时相点SCF存在与否并进行半定量分析。结果成功构建了大鼠双侧下颌骨的临界性骨缺损和自愈性骨缺损模型。免疫组织化学结果显示骨缺损愈合的各时相点SCF均有较高的表达率,但临界性骨缺损与自愈性骨缺损在各时相点的表达具有统计学意义,且BMSCs在骨缺损的愈合过程中也均有表达,Western (?)(?)迹法结果再一次表明SCF在临界性及自愈性骨缺损愈合过程中均有表达,且后者表达更为显著。结论SCF在临界性骨缺损和自愈性骨缺损愈合过程中均有表达,且BMSCs在骨缺损愈合初期也均有表达,说明SCF与BMSCs在骨缺损区域的募集可能有一定关系,即表明SCF在骨缺损修复中发挥重要的作用。
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