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心肌肽素对豚鼠和大鼠心室肌细胞的电生理作用 目的:研究心肌肽素对豚鼠和大鼠心室肌细胞的L-型钙通道、钠通道和钾通道电流的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的药理作用机制。 方法:用急性酶解法分离获得单个豚鼠和大鼠心室肌细胞。用标准的全细胞膜片钳技术记录各种离子通道电流,观察不同浓度的心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)、钠电流(INa)、内向整流钾电流(IK1)的影响,及大鼠心室肌细胞IK1和和瞬时外向钾电流(Ito)的影响。 结果:通过酶解法得到的豚鼠和大鼠心室肌细胞能够记录到动作电位和各种离子通道电流。表明其具有良好的细胞电生理特性。 在测试电压+10 mV的条件下,心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L浓度依赖性增强豚鼠心室肌细胞ICa-L,使ICa-L分别增加(5±4)%、(21±5)%、(30±5)%、(55±8)%、(76±11)%、(88±14)%,半最大有效浓度(EC50)为(18±6)mg/L。心肌肽素50 mg/L使激活时间(TTP)从(6.7±0.9)ms缩短为(5.9±0.7)ms(P<0.01)。心肌肽素50 mg/L使ICa-L电流密度-电压曲线下移,但激活电位、峰电位和I-V曲线的形状不变。心肌肽素50 mg/L使激活曲线向负电位方向变化,半数激活电压从(-4.3±0.4)mV减少至(-8.6±0.4)mV(P<0.05),不影响稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。 在测试电压-20 mV的条件下,心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞INa,使INa分别抑制(0±1)%、(6±2)%、(10±2)%、(15±1)%、(22±9)%、(30±6)%。心肌肽素50 mg/L使INaTTP从(2.8±0.7)ms延长至(3.0±0.8)ms(P<0.05)。心肌肽素50 mg/L使INa电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电位、峰电位、反转电位和I-V曲线的形状。心肌肽素50 mg/L不影响稳态激活曲线、稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。 IK1内向和外向电流分别以测试电压-100 mV和-30 mV条件下的稳态电流作为观察指标。心肌肽素10、50 mg/L分别使豚鼠心室肌细胞抑制(24±7)%、(32±6)%,而心肌肽素100、500 mg/L分别使豚鼠心室肌细胞IK1内向电流增加(22±11)%、(357±43)%。心肌肽素10 mg/L使大鼠心室肌细胞IK1内向电流抑制(33±7)%,而心肌肽素100、250、500 mg/L分别使大鼠心室肌细胞IK1内向电流增加(18±5)%、(134±24)%、(292±66)%。所有浓度的心肌肽素对IK1外向电流无明显影响。心肌