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藤茶,学名显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata),广泛分布于我国南方。由于其广泛的生物学活性而备受关注,在其茎叶中含有的主要黄酮是二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)。DMY具有清除氧自由基、消炎、抑菌、降脂、抗肿瘤等生理活性,其化学结构具有很高的超离域度和大π键共轭体系,能与金属离子形成稳定的配合物。本文探讨了藤茶中DMY的提取及优化工艺,设计合成了钒、锌和铬等系列二氢杨梅素金属配合物。此外,初步测试了这些金属配合物与DNA的相互作用、抗氧化性和抗肿瘤作用。主要的研究内容如下:1.对提取溶剂进行初筛后,再通过正交设计实验优化了DMY的提取工艺。实验显示,乙酸乙酯为所选中的最佳提取溶剂。当提取时间50 min、提取温度50℃、料液比1:20时,DMY的提取率可达14.28%左右。方差分析结果显示,影响DMY提取率的几种因素的大小顺序为:料液比>提取温度>提取时间。2.为了考察相关二氢杨梅素金属配合物的生物活性,合成了Zn-DMY、Cr-DMY和VO-DMY,以元素分析、IR、ESI-MS和1H NMR对化合物进行了结构表征。采用紫外-可见滴定法、荧光分光光度法、流体力学分析法以及琼脂糖凝胶电泳法测试了上述化合物与DNA的相互作用。实验显示,这些化合物均能以插入方式与小牛胸腺DNA结合。荧光滴定实验显示DMY、VO-DMY、Cr-DMY以及Zn-DMY都可以与EB竞争性抢夺DNA的结合位点,相应的Ksv值分别为:4.03、0.32、0.55和1.08×104L/mol。而流体力学分析法显示,随着配合物与DNA的浓度比例增大,粘度呈明显上升的趋势。其中,VO-DMY上升的幅度最大,其次是Zn-DMY和Cr-DMY,且均强于DMY配体。另外,这些化合物在双氧水存在的条件下,对质粒DNA具有良好的断裂作用。3.运用MTT法并以顺铂作为阳性对照,观察了这些配合物对肝癌细胞HepG2增殖的抑制能力。实验结果表明,VO-DMY对HepG2细胞抑制能力最强,其IC50值为23.8±1.9μmol/L。为了解VO-DMY对HepG2细胞的作用机制,运用流式细胞术对细胞的凋亡率以及凋亡周期进行了检测。结果表明,VO-DMY可以诱导细胞凋亡,且具有浓度依赖性;细胞的周期检测还显示,HepG2细胞的周期主要被阻滞在G2/M期。但是,VO-DMY诱导HepG2细胞凋亡机制,仍有待于进一步的研究。此外,运用了Fenton反应对相关配合物的羟基自由基清除能力进行了检测。实验还表明,DMY、Cr-DMY、Zn-DMY和VO-DMY都具有一定的清除该自由基的活性,其中,VO-DMY的清除作用最佳,而DMY、Cr-DMY和Zn-DMY清除效果相近,相关机理有待于进一步研究。