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目的：从细胞生物学角度出发,研究雷公藤内酯(Triptolide)、雷公藤多苷及其与白芍总苷配伍对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1增殖、周期、凋亡及相关蛋白表达的影响,为需公藤制剂治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)及对其成骨的影响机制提供实验基础,也为临床上雷公藤的配伍治疗提供一定的理论支撑。方法：1.体外培养MC3T3-E1细胞,用BrdU标记法、流式细胞术和hochest染色法分别检测不同浓度的需公藤内酯对细胞增殖、周期和凋亡的影响；再用western blot方法检测细胞增殖、周期和凋亡相关蛋白(PCNA; CyclinD1、Cyclin E; Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3)的表达水平。2.设立需公藤多苷配伍白芍总苷、雷公藤多苷、雷公藤内酯、白芍总苷及空白对照组5组,用MTT法检测各组细胞增殖情况；并用western blot方法检测周期及凋亡相关蛋白(Cyclin D1、Cyclin E及 Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3)的表达水平。结果：1.不同浓度的雷公藤内酯对MC3T3-E1细胞增殖、周期、凋亡及相关蛋白的影响：(1) BrdU标记法显示7nM和14nM组细胞的吸光度值较0nM组明显降低；(2)流式细胞术显示细胞在G0-G1期的比例随雷公藤内酯浓度增加而增加；(3) hochest染色发现雷公藤内酯组中出现凋亡细胞,随浓度增加而增多,流式细胞术显示晚期凋亡率随雷公藤内酯浓度的增加而升高；(4) western blot显示与0nM组相比,7nM、14nM组Cyclin D1和Cyclin E含量明显降低,Bax和cleaved-caspase-3含量显著升高,14nM组PCNA和Bcl-2含量也明显降低。2.雷公藤多苷及与白芍总苷配伍对MC3T3-E1细胞增殖及周期、凋亡相关蛋白的影响：(1)MTT法显示与空白组相比,雷公藤多苷配伍白芍总苷组、雷公藤多苷组、白芍总苷组吸光度值降低均不明显,而雷公藤内酯组显著降低。(2) western blot结果显示：①雷公藤多苷配伍白芍总苷组较空白组Bcl-2、Bax和cleaved-caspase-3升高；较雷公藤多苷组Bcl-2升高,cleaved-caspase-3明显降低,Bax无明显差异；较雷公藤内酯组Bcl-2升高,Bax和cleaved-caspase-3明显降低。②雷公藤多苷组、需公藤内酯组较空白组Cyclin D1、Cyclin E和Bcl-2均有降低,Bax和cleaved-caspase-3明显升高；雷公藤多苷组较雷公藤内酯组Bcl-2升高,Bax明显降低,cleaved-caspase-3无明显变化。③白芍总苷组Bcl-2轻度升高,Bax和cleaved-caspase-3无明显变化；结论：1.雷公藤内酯能将MC3T3-E1细胞周期阻滞在G0-G1期；2.雷公藤内酯能有效抑制MC3T3-E1细胞的增殖和促进其凋亡,且呈浓度效应关系；3.雷公藤多苷及其与白芍总苷配伍能促进MC3T3-E1细胞凋亡,但对细胞增殖和周期作用轻微或是不明显；4.雷公藤内酯对MC3T3-E1细胞增殖、周期和凋亡作用最强,雷公藤多苷其次,雷公藤多苷与白芍总苷配伍作用不明显,白芍总苷无明显作用。