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一.目的通过观察转化生长因子-a(transforming growth factor alpha,TGF-a)、基质金属蛋白酶-9(matrix metaUoproteinase-9,MMP-9)、微血管密度(microvessel density,MVD)在中耳胆脂瘤中的表达,分析TGF-a、MMP-9及MVD之间的相关性,探讨TGF-a、MMP-9、MVD对中耳胆脂瘤侵袭能力的影响。二.材料与方法1.收集44例胆脂瘤型中耳炎病人术中新鲜标本,其中10例胆脂瘤患者术中同时取外耳道骨段皮肤,作为正常对照。所取标本经10%福尔马林固定后,制成石蜡切片。2.按胆脂瘤侵袭能力将44例胆脂瘤标本分为五组:S1级:6例;S2级:5例:S3级:15例;S4级:13例;S5级:5例。3.采用免疫组织化学SP染色法检测TGF-a、MMP-9、Ⅳ型胶原蛋白在中耳胆脂瘤及外耳道皮肤中的表达,并采用计算机图像分析系统对TGF-a、MMP-9染色结果进行定量分析;用Ⅳ型胶原蛋白标记胆脂瘤及外耳道皮肤微血管,并以MVD测定其血管生成。4.实验数据采用SPSS10.0软件进行统计分析。三.结果1.TGF-a在胆脂瘤组织及正常外耳道皮肤中的表达TGF-a在44例胆脂瘤上皮组织呈中等阳性或强阳性反应,表现为棕黄色颗粒密布于上皮各层细胞的胞浆中,呈现从基底层向角质层染色逐渐增强的趋势。10例外耳道皮肤组织表现为表皮全层稀疏均一的弱阳性表达。2.MMP-9在胆脂瘤组织及正常外耳道皮肤中的表达MMP-9在44例胆脂瘤上皮组织中呈中等阳性或强阳性反应,阳性产物主要定位于细胞浆,上皮各层均有染色,从基底层至角质层染色逐渐增强。10例外耳道皮肤组织表现为弱阳性表达。3.Ⅳ型胶原蛋白在胆脂瘤组织及正常外耳道皮肤中的表达胆脂瘤组织中见新生的微血管较丰富、较密集,且在形态上表现出异常的改变。正常外耳道皮肤组织中的微血管较少、较稀疏,没有明显的形态学上的改变。4.计算机图像分析系统检测TGF-a、MMP-9灰度值(1)TGF-a在44例胆脂瘤组织中的平均灰度值为120.73±11.87,在10例外耳道皮肤中的平均灰度值为145.66±3.44,两组间差异有统计学意义(t=11.91,P<0.05)。(2)MMP-9在44例胆脂瘤组织中的平均灰度值为119.60±14.20,在10例外耳道皮肤中的平均灰度值为154.73±6.93,两组间差异有统计学意义(t=11.46,P<0.05)。5.微血管计数44例胆脂瘤组织平均MVD为37.85±3.93/mm~2(n=44),10例外耳道皮肤组织平均MVD为13.28±2.58/mm~2(n=10),两组间差异有统计学意义(t=18.81,P<0.05)。6.随着胆脂瘤侵袭能力的增强,TGF-a、MMP-9及MVD的表达均相应地增加。7.胆脂瘤中TGF-a与MVD,MMP-9与MVD,TGF-a与MMP-9之间均有正相关关系(P<0.05)。四.结论1.TGF-a、MMP-9均与MVD之间存在正相关关系,提示TGF-a、MMP-9可能在胆脂瘤血管生成中有重要作用。2.TGF-a与MMP-9之间存在正相关关系,提示TGF-a与MMP-9可能在胆脂瘤血管生成中有协同作用。3.TGF-a、MMP-9、MVD与胆脂瘤侵袭能力成正比,提示TGF-a、MMP-9、MVD可能与胆脂瘤的侵袭能力密切相关。